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益气温阳活血方含药血清对大鼠肥大心肌细胞原癌基因c-fos、c-myc表达的影响

2014-09-13李春陵顾广富罗建华杨冬花

中国老年学杂志 2014年17期
关键词:血清

李春陵 顾广富 罗建华 杨冬花

(贵州省人民医院干医科,贵州 贵阳 50002)

持续的交感神经过度激活是慢性心力衰竭的重要特征,也是心室重塑和病情恶化的重要促进因子〔1〕。c-fos、c-myc是调控细胞增殖的相关原癌基因,通过调控肥大晚期基因的表达,导致心肌细胞蛋白质合成增加,蛋白表型向胚胎型转化〔2〕。益气温阳活血方在心力衰竭早期可通过PPARγ信号通路调节血管紧张素(Ang)Ⅱ、醛固酮的表达,防止心室重塑,改善心脏功能〔3〕,但是否能通过抑制c-fos、c-myc的表达防止心室重塑,目前尚不清楚。本研究益气温阳活血方对肥大心肌细胞c-fos、c-myc表达的影响。

1 材料和方法

1.1实验动物 健康Wistar大鼠30只,体重(250±10)g,雌雄各半;Wistar乳鼠40只,新生2 d左右,雌雄不拘,由贵阳医学院实验动物学部提供。

1.2益气温阳活血方组成 人参30 g,黄芪30 g,桂枝9 g,丹参30 g,益母草30 g,红花6 g,白术15 g,泽泻9 g,茯苓15 g,葶苈子9 g,炙甘草6 g等11味中药,药材从贵州省人民医院中药房一次性选购,生药按比例取好,加水浸泡1 h,第1遍煮沸40 min,滤渣取汁,再加水煮沸15 min,滤渣取汁,合并2次煎液,在水浴中浓缩至每毫升煎液含生药4 g,保存备用。

1.3试剂 卡维地洛(齐鲁制药有限公司,批号:H20000100),胎牛血清(GIBCO公司),AngⅡ(Sigma公司),1640培养基、胰酶(Sigma公司),大鼠Anti-c-fos抗体、大鼠Anti-c-myc抗体(Santa Cruz公司),ECL显影试剂盒(Santa Cruz 公司),AD、NE(IBL公司),制胶、电泳及转膜仪(Bio-Rad公司)。

1.4含药血清制备 大鼠分为中药组10只,予益气温阳活血方(8 ml/kg)灌胃治疗;卡维地洛组10只,予卡维地洛(50 mg·kg-1·8 ml-1蒸馏水)灌胃治疗;空白血清组10只,予蒸馏水(8 ml/kg)灌胃。均每日给药2次,共8 w。末次灌胃后1 h颈动脉采血处死动物,分离血清。……

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