马 晨 刘晓智 刘振林

(天津市第五中心医院神经内科，天津 塘沽 300450)

创伤性颅脑损伤(TBI)是最常见的机械性损伤之一，原因包括道路交通事故损伤、高空坠落损伤和攻击损伤，极容易导致死亡，颅脑损伤占创伤总数15%，但死亡率却占创伤总数的85%〔1〕。基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9又称基质溶素-1，主要由巨噬细胞、结缔组织细胞和肿瘤细胞生成。TBI导致血脑屏障损伤，MMP-2 和 MMP-9对TBI死亡细胞的清除扮演着重要的作用，是调节TBI损伤的重要细胞因子之一。本研究探讨大鼠颅脑损伤后MMP-2 和 MMP-9表达的变化及与损伤时间的关系。

1 材料与方法

1.1实验动物 选用健康成年SD大鼠96只，由本院中心实验室提供，体重(250±50)g，雌雄不分，置于安静、温暖、避强光的环境中分笼饲养。

1.2试剂和装置 试剂：MMP-2和MMP-9兔抗鼠单克隆抗体(购于凯基生物公司)，二抗、DEPC及SABC试剂盒、DAB显色剂等(购于上海生工生物公司)。装置：定向仪、PVC管、铁制砝码和铁质撞击小锤组成(由中心实验室提供)。FTC-2000 型实时荧光定量PCR仪(由中心实验室提供)。

1.3大鼠脑外伤模型建立

1.3.1实验动物分组 运用随机数列表，把大鼠随机分为A组(正常对照组)8只、B组(假损伤组)8只和C组(损伤组)80只。C组又分为10组,分别为C1组损伤后 (1 h)，C2组损伤后(6 h)，C3组损伤后(12 h)，C4组损伤后(24 h)，C5组损伤后(2 d)，C6组损伤后(3 d)，C7组损伤后(5 d)，C8组损伤后(7 d)，C9组损伤后(10 d)，C10组(14 d)共，每组8只。

1.3.2实验模型制作 将大鼠称重后吸入乙醚麻醉后，剪去顶部鼠毛，按照0.35 g/kg腹腔注射10%水合氯醛麻醉，消毒皮肤后，将大鼠固定于定向仪装置内，将撞击小锤放入骨窗内，沿中线切开头皮长约1.5～2.5 cm，分离骨膜，用牙科钻磨开颅骨，以前囟后1.5 mm、中心右侧2.5 mm为中心，形成直径5 mm骨窗，保持硬脑膜完整。……