李 鑫 张晓芸 金成文 成 敏

(潍坊医学院基础医学院，山东 潍坊 261053)

吲哚美辛已广泛应用于心血管疾病的治疗〔1〕，但其机制目前尚不清楚。传统观点认为损伤周边的内皮细胞可通过迁移、增殖修复内皮缺损。但成熟内皮细胞是终末分化细胞，其增殖潜能有限，修复能力并不理想〔2〕。内皮祖细胞(EPCs) 是成熟血管内皮细胞的前体细胞，正常情况下在外周循环血中的数量较少。受各种因素的刺激动员后(如血管内皮受损后)，外周血中EPCs的数量迅速增加，进而EPCs向血管内皮细胞分化，在内皮损伤后的修复过程中起到重要作用〔3，4〕。本研究着重观察吲哚美辛对损伤颈动脉再内皮化的作用，并从EPCs的角度探讨其作用机制。

1 材料方法

1.1实验动物 健康成年雄性SD大鼠，体重250 g左右，由潍坊市解放军第八十九医院动物实验室提供。

1.2主要试剂与药品 Histopaque-1083梯度离心液及伊文氏蓝(Evens blue)(美国Sigma公司)；EGM-2(美国Lonza公司)；吲哚美辛钠(上海源叶生物科技有限公司)；3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基苯四氮唑蓝(MTT)(北京中杉)；纤维连接蛋白(Fn)及DAPI(德国Roche)；Matrigel 基质胶(美国BD公司)；改良的Boyden小室及8 μm聚碳酸醋微孔滤膜(江苏海门麒麟医用仪器厂)；Forgety导管(Edwards Lifesciences，Unterschleissheim，Germany)。吲哚美辛钠的配制：体内实验：使用生理盐水配制成5 mg/ml的储存液，过滤后储存于4℃冰箱内备用。体外实验：使用EGM-2培养液配制成5 mg/ml的储存液，过滤后储存于4℃冰箱内备用。

1.3方法

1.3.1动物模型制备及分组 健康SD大鼠随机分为模型组及吲哚美辛处理组。采用球囊法制备大鼠颈动脉损伤模型：10%水合氯醛0.3 ml/100 g腹腔注射麻醉，分离左侧颈总动脉。……