颜廷俊

TECAN-BEPIII全自动筛查仪器应用于输血检验的价值分析

颜廷俊

目的 探讨分析TECAN-BEPIII全自动筛查仪器应用于输血检验过程中最佳参数的选择,提高TECAN-BEPIII全自动筛查仪器在医学实践应用中的特异性和灵敏度。方法 由TECAN全自动加样器完成样品处理后,再由BEPⅢ按照标准的设定程序进行酶标板孵育、洗板、加试剂以及判读结果等实验步骤。结果 在抗-HIV检测中,对于较粘稠的液体如阿克苏抗-HIV的稀释液,TECAN全自动加样器的吸液速度、拖尾气隙、过量体积、附加体积需依次设定为：100、20、150、150 μl；对于ALT丙酮酸标准品,TECAN全自动加样器的吸液顺序为①基质;②磷酸缓冲液；③丙酮酸。结论 在优化机器参数的基础上,TECAN-BEPⅢ全自动筛查仪器能够实现包括血液ALT和抗-HIV等检测项目的自动化操作,不仅降低了本院工作人员的劳动强度,而且对提高血站的整体检验水平,保证输血安全具有重要意义。

TECAN-BEPⅢ全自动筛查仪器；ALT；抗-HIV；人工操作

输血检验在输血过程中起着至关重要的作用。目前,本站院TECAN-BEPⅢ全自动筛查仪器,以促进输血检验过程由手工操作向自动化操作的转变。但新机器在使用前需要进行校正和设置,山东省济南市第三人民医院工作人员经过努力摸索出了在抗-HIV以及ALT检测中,TECAN-BEPIII全自动筛查仪器所应选用的最佳工作模式及参数,提高了检测的准确性。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 xx市无偿献血者捐献的血液。

1.2 检测试剂和仪器 试剂包括：抗-HIV试剂盒；ALT赖氏法试剂盒；检测仪器包括：TECAN全自动加样器；BEPⅢ全自动酶免分析系统等。

1.3 方法

1.3.1 抗-HIV免疫检测 人工操作严格按照试剂盒说明书进行。而TECAN-BEPIII全自动筛查仪器严格进行微机编程,同样基于试剂盒说明书进行操作。由TECAN全自动加样器完成样品处理后,再由BEPⅢ全自动酶免分析系统按照标准的设定程序来进行标板孵育、洗板、加试剂以及判读结果等实验步骤。

1.3.2 ALT检测实验方法 本院在ALT检测中使用96孔平板,这样能够保证基质和血清在微孔中进行充分反应,提高试验结果的准确性。步骤为：①TECAN全自动仪器进行加样；②在BEPⅢ全自动酶免分析系统上完成标板孵育、加试剂和判读结果等试验步骤。

1.4 统计学方法 数据结果均使用SPSS18.0软件来进行统计和分析。

2 结果

2.1 TECAN全自动加样器进行较粘稠液体加样时的参数选择 本试验过程中所使用的荷兰阿克苏抗-HIV的稀释液较国内厂家的同种稀释液产品较粘稠,为此本院工作人员利用正交实验设计的方法对常规的液体模式进行了改进,从而选择出了新的分配液体模式。经验证,新的液体模式能够很好的解决较粘稠液体在抗-HIV检测过程中所导致的问题。

表1 TECAN加阿克苏抗-HIV稀释液的液体参数新旧模式对比

2.2 TECAN全自动加样器对丙酮酸标准品进行加样的顺序确定 TECAN全自动加样器使用单针对丙酮酸标准品进行加样时,最佳吸样顺序为①基质；②磷酸缓冲液；③丙酮酸。

3 讨论

在用TECAN全自动加样器对ALT丙酮酸标准品进行加样时,需要进行单针分3次吸液 。在本站的试验过程中,本院工作人员发现,利用TECAN全自动加样器进行加样时,应先吸基质。因为分配液体之后,基质的量较大,针管内即使有微量的基质残留,对试验结果的影响也不是很大。除此以外,基质对丙酮酸具有冲洗的作用,这样能够在最大程度上降低丙酮酸残留的可能性。

在利用TECAN-BEPIII全自动筛查仪器进行抗-HIV检测过程中,作者发现TECAN全自动加样器使用常规的液体分配模式对较粘稠液体如阿克苏抗-HIV稀释液进行处理时,很容易出现2个问题。第一：加样针在操作过程中漏液,这样就会导致个别孔出现假阳性的结果,影响实验准确度；第二：加样针最后分配出来的液体稀释液体积较低且含有超量的泡沫,进而导致该排出现均为阳性的结果［1］。经过对各项液体参数的优化之后,经试验验证,以上两个问题都得到较好解决。其原因在于：TECAN自动加样器的针头和导管通过系统气隙将离子交换水和加样试剂隔开,系统气隙过大会导致粘稠液体下滴,同时也更易产生泡沫；系统气隙过小则起不到隔离离子交换水和加样试剂的作用［2］。因此,选择合适的系统气隙至关重要。在本试验中,系统气隙由20 μl优化为10 μl,取得较为良好的检测效果。

综上所述结合本院试验结果,作者认为：TECAN-BEPIII全自动筛查仪器对于保证输血安全具有重要意义,值得进一步推广应用。

［1］ 王珺,邢培清,方建华,等.STAR-FAME全自动血液筛查仪器在检验中的应用研究.河南医学研究,2010,19(01):12-18.

［2］ 周国平,周喆,向东,等.全自动血型分析仪应用于献血者血型筛查.中国输血杂志,2011,24(05):395-398.

250101 山东省济南市第三人民医院输血科