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大肠癌外周血循环肿瘤细胞数的检测及临床意义

2014-08-24郝立群

实用临床医药杂志 2014年23期
关键词:检测

王 成, 郝立群

(吉林省肿瘤医院 内四科, 吉林 长春, 130012)

手术或化疗治疗后,经病理学检查为阴性的大肠癌(CRC)患者通常会在若干年后再次复发,因为肿瘤细胞存在微转移-难以检测的循环肿瘤细胞(CTCs)进入血液,并形成新的病灶。CRC患者肿瘤细胞高表达两种肿瘤标志物,细胞角蛋白20(CK 20)[1]和癌胚抗原(CEA)[2]。进入外周血的CTCs也表达CK 20和CEA。CK20于1990年被发现,只局限性表达在胃肠上皮细胞,而在正常淋巴组织、血液组织、骨髓组织中不表达,在非上皮组织中检测到CK 20提示存在当有大肠癌细胞存在时。CK20是检测肠癌微转移的既特异又敏感的良好标志物。CEA是一种常用的大肠癌诊断标志物,但准确性只有50%左右。使用多重聚合酶链式反应(PCR)[3]结合荧光定量PCR(RTFQ PCR)方法检测血液中的CK20及CEA mRNA阳性表达率,旨在建立一种非侵袭性、高效的检测CRC微转移的方法。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取吉林省肿瘤医院2011年11月—2013年11月收治的经病理检查确诊的大肠癌患者58例(CRC组),其中结肠癌20例,直肠癌38例。男32例,女26例;年龄41~67岁,中位年龄53岁; Ducke′s分期为: A期9例,B期16例,C期13例,D期20例。同时选取24例非恶性病变腹部手术患者作为对照。其中男14例,女10例;年龄44~75岁,中位年龄56岁。2组患者性别、年龄等一般资料无显著性差异(P>0.05), 具有可比性。

1.2 标本采集

所有患者于治疗前于上肢浅静脉取血,弃去注射器抽取的前5 mL血液以减少标本被皮肤细胞污染可能。常规肝素抗凝,淋巴细胞分离液分离单个核细胞,加入1 mL Trizol保存于-20 ℃。

1.3 主要试剂和仪器

Trizol Reagent RNA提取试剂盒(……

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