李比海，罗丽娟，梁兴林，金石军，饶军华

(广东蓝岛生物技术有限公司，广州 510555)

早孕期的阴道出血，在人类妊娠早期的发生率较高，有研究表明早孕期的阴道出血，导致的早产风险达到了20%，而有关的机制并不明确[1-3]。食蟹猴在生理上与人类比较相近，遗传物质同源性、中枢系统、呼吸及消化循环系统，与人类都有高度的相似性，是医学研究中理想的实验动物[4]。早孕出血症状在食蟹猴的妊娠期也常有发生，但对其研究却很少。这种现象，不能判断是否是食蟹猴的正常生理现象，在B超确认已经怀孕的情况下会不断地进行给药保胎；而在没有B超等辅助检查手段时，只通过一般的外观状态观察，认为阴道有血就是月经血，错误地判定为猴子正常的月经。本文通过研究食蟹猴的早孕期出血现象及与流产之间的相关性，从而为食蟹猴的相关生殖研究提供一些参考数据，为进一步了解人类的相关机制做基础。

1 材料和方法

1.1 实验动物：

由广东蓝岛生物技术有限公司提供(实验动物生产许可证号：SCXK(粤)2009-0010)。健康SPF级雌性食蟹猴78头：年龄3～8岁，体重3.2 ～ 5.0 kg，其中初产雌性食蟹猴45头，经产33头只；配种用健康SPF级雄性食蟹猴12头只：年龄8 ～ 13岁。试验期间每头猴除交配期公母配对合笼外，均单笼饲养(实验动物使用许可证号：SYXK(粤)2008-0088)，温度(18～26)℃，光照12 h明暗交替，自动控制系统进行定时排风。

1.2 仪器设备：

B超：意大利百胜(esaote)生产，型号：MyLabTM30CV。

1.3 试剂：

黄体酮注射液(浙江仙琚制药生产，批号110417)；维生素E(南宁富莱欣生物科技有限公司生产，批号20110206)

1.4 月经观察

每天上午和下午各1次观察月经状况，一般上午观察时间是在冲洗猴房和单笼之前进行，首先观察猴笼下粪盘有无血迹，再看会阴外部有无血迹，并使用生理盐水冲洗食蟹猴会阴口后，使用无菌棉签擦拭阴道，观察阴道内有无月经血，有血迹则视为有月经，每次观察到的出血第1天为此猴本次月经周期第1天(D1)。

1.5 合笼交配

通过雌性食蟹猴的月经期确定交配日，在月经首日后的第12 ～ 14天将雌猴和雄猴按1∶1比例同笼交配3 d，同笼的第二天记为怀孕第0天(GD0)。交配结束后，雌雄分笼。未怀孕雌猴继续观察月经周期，并进行下一次交配。

1.6 B超检查

在雌猴怀孕的第22天观察到孕囊，即宫内出现圆形的光环和无回声暗区时判定为怀孕(图1)。未观察到孕囊判定为未孕(图2)。所有雌猴怀孕的第30天，再次进行B超检查，观察到胚芽和胎心闪动时可进一步确定该猴怀孕[5]。

1.7 食蟹猴早孕期出血症状界定

“1.6”小节中B超检查已确定的怀孕猴，在这30 d的早孕期间有血样液体从其阴道流出，则定义该猴有早孕出血症状。

1.8 保胎

在有早孕期出血食蟹猴中随机选择了10头进行药物保胎对照，方法是：黄体酮注射液臀部肌肉注射，10 mg/次，1次/d；其次辅以维生素E拌料(米糊)饲喂，20 mg/次，1次/d；保胎1周。

2 结果

共78头雌性食蟹猴用于交配。33头经产雌性食蟹猴怀孕20头，早孕期出血的有18头只，早孕期出血率为90%，早孕期出血后3个月内流产的为0头，早孕期出血引起的流产率为0%；45头初产雌性食蟹猴怀孕的有20头，早孕期有出血的有14头，早孕期出血率为70%，早孕期出血后3个月内流产的为0头，早孕期出血引起的流产率为0%。综合初产经产雌性食蟹猴早孕期出血的比例达到了80%；雌性食蟹猴早孕期出血引起的平均流产率是0%。平均月经周期为30.79 d，平均月经天数为2.37 d，早孕期平均出血天数为5.36 d(最长持续13 d，最短为1 d)。

选择的5头初产，5头经产有早孕出血食蟹猴进行保胎(药物)为对照，10头猴均没有流产；而其余22头有早孕期出血但没有进行保胎的猴也没有流产。结果显示，保胎与不保胎没有差异性，流产率均为0%。

B超结果，怀孕和未孕食蟹猴子宫B超图像见图1和图2。

图1 怀孕猴子宫B超图像

图2 未孕猴子宫B超图像

3 讨论

食蟹猴早孕出血率达到了80%，与流产率的0%没有相关性，早孕期阴道出血是食蟹猴的一个正常的生理现象。而药物保胎的对照结果表明，对早孕期出血的食蟹猴进行药物保胎是非必要的。

分析食蟹猴早孕期阴道出血这一现象的机制。食蟹猴于怀孕后的第一个月出现阴道出血，而出血的时间刚好是在理论月经期内，从而推测可能是因为胚胎着床后，子宫还有大面积空腔，空腔在激素低的情况下，月经周期正常到来，内膜脱落和更新而出血。早孕期阴道出血时间平均达到了5～6 d，相较于正常的月经时间2～3 d，明显延长。这一现象，也可能正是因为低激素水平下对子宫内膜的控制失调。而研究过程中，发现早孕期经产猴的出血率高于初产猴，这可能的原因是初产猴身体还处于发育期[6]，孕期激素水平调控能力强于经产猴。

由于食蟹猴与人有高度的相似性，对比将人在早孕期的阴道出血现象视为一类病症，是导致流产的重要因素[7]提出了质疑。相应的人在早孕月经期内的阴道出血，也可能是在低激素情况下的一个正常现象。

参考文献：

[1] 李文英，李丹，王强，等. 早孕期出血249例分析[J]. 河北医药, 2003, 4(25): 260.

[2] Louis R. Sibal, Kurt J. Samson. Nonhuman Primates: A Critical Role in Current Disease Research [J]. Institute for Laboratory Animal Research Journal, 2001, 2(42): 74-84.

[3] 周美茜，蔡畅，黄引平. 早孕期阴道出血与早产关系的临床研究[J]. 临床研究, 2011,49: 40-42.

[4] Gomez R, Romero R, Nien J K, et al. Idiopathic vaginal bleeding during pregnancy as the only clinical manifestation of intrauterine infection[J]. J Matern Fetal Neonatal Med, 2005, 18(1)：31-37.

[5] 李志雄，高玲霞，范春梅, 等. B-型超声波诊断猕猴早期妊娠[J]. 上海实验动物科学, 1998, 18(1): 26-28.

[6] 陈翠莲. 初产母猪和经产母猪营养需要[J]. 广东饲料, 2013, 6(22): 33-35.

[7] 卢翠云，莫志卫. 妊娠早期阴道出血的相关因素及治疗[J]. 齐齐哈尔医学院学报, 2013, 10(34): 1437-1438.