王佳烈，马国强

论著·基础

人树突状细胞与肺癌细胞A-549融合疫苗生物学 特性研究

王佳烈，马国强

目的探讨人树突状细胞(DC)与人肺癌细胞A-549融合所得疫苗在制备过程中的生物学特性，总结高效制备融合疫苗的方法。方法应用GM-CSF和IL-4优化的方法制备肺癌患者人外周血单核细胞以获得DC，寻找DC制备率最高时间段；同时应用PKH672GL(绿色荧光)和PKH262GL(红荧光)分别标记DC和肺癌细胞A-549细胞，筛查最佳的融合比例。结果应用GM-CSF和IL-4优化法进行DC制备第7天所得百分率为(66.26±5.13)%，高于其他时间(P<0.05)；通过对比不同融合比例DC与人肺癌细胞A-549，显示1∶1时所取得的融合百分率为(35.15±2.16)%，高于其他比例(P<0.05)。结论在DC制备过程中制备第7天所得DC百分率最高，应选取此时作为提取DC的最佳时间；同时DC与人肺癌细胞A-549以1∶1比例相融合所得疫苗百分率最高。

人树突状细胞；人肺癌细胞A-549；融合；疫苗

肺癌是十分常见的一种恶性肿瘤，目前的治疗方法主要有放疗、化疗及手术等多种方式，但治疗效果仍不十分理想。细胞免疫治疗是近年来新兴的一种肿瘤治疗方式。其主要原理为诱导树突状细胞(DC)和自体T细胞，使其成为细胞毒性T淋巴细胞。其中DC作为一种递呈细胞，不仅能够加工和递呈抗原，还能有效激活T淋巴细胞使其成为效应T细胞，因此DC在免疫治疗中有着十分重要的作用[1]。现制备人外周血单核细胞获得DC以找出其制备的最佳时段，并通过标记DC与人肺癌细胞A-549，找出二者的最佳融合比。

1 材料与方法

1.1 材料 应用15%胎牛血清(FCS)的RPMI1640培养50例人肺癌细胞A-549，纳入标准：经过临床诊断、影像学诊断和病理诊断均确诊为肺癌患者；尚未进行放疗、化疗或手术治疗；患者生存时间保守估计﹥6个月。排除标准：存在严重躯体性疾病；出现脑转移；自身或家族内存在精神病病史；……