刘 文，孙 悦，于浚玫

(1.天津市安定医院，天津 300222； 2.天津市药品检验所，天津 300074)

气相色谱法测定琥珀酸甲泼尼龙中残留的有机溶剂*

刘 文1，孙 悦2，于浚玫1

(1.天津市安定医院，天津 300222； 2.天津市药品检验所，天津 300074)

目的：建立琥珀酸甲泼尼龙中4种残留有机溶剂的分离测定方法。方法：采用顶空进样毛细管气相色谱法，应用DB-I石英毛细管柱(30 m×0.53 mm ，0.5 μm )，载气为氮气，氢火焰离子化检测器(FID)，程序升温，柱温40 ℃保持10 min，以2 ℃/min的速度升至80 ℃，保持5 min，再以40 ℃/min的速度升至230 ℃，保持10 min。结果：4种有机溶剂均能得到有效分离，在所考查的浓度范围内线性关系良好，r为0.998 4～0.999 9，平均回收率为97.9%～102.2%。结论：本方法灵敏、简便快速、结果准确，可用于琥珀酸甲泼尼龙中残留有机溶剂的检测。

气相色谱法，琥珀酸甲泼尼龙，残留有机溶剂

琥珀酸甲泼尼龙，别名甲基泼尼松龙琥珀酸酯[1]，为人工合成的糖皮质激素,主要用于甲泼尼龙琥珀酸钠针的原料药，有抗炎、免疫抑制及抗过敏活性，用于风湿性疾病、胶原疾病、皮肤疾病、过敏状态、眼部疾病、胃肠道疾病、呼吸系统疾病、水肿状态等的对症治疗，作为免疫抑制剂而治疗肿瘤、休克等。由于生产工艺原因，琥珀酸甲泼尼龙生产过程会引入一定量的有机溶剂，而不同的工艺带进的残留溶剂也各不相同，这些残留溶剂根据毒性不同会对人体产生不同程度的伤害，应予控制。目前，国内仅有两家生产企业持有琥珀酸甲泼尼龙批准文号，我们在参考其合成工艺的前提下，对其产品中的有机溶剂进行了考查，将甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺作为控制对象，采用二甲基亚砜作为溶剂，建立了一次色谱过程[2]同时测定上述溶剂的毛细管气相色谱法。实验结果显示，该方法简便、快捷，结果准确，重现性良好。

1 仪器与试剂

Agilent 7890A气相色谱仪，FID检测器。甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺均为分析纯试剂，二甲基亚砜为色谱纯试剂。琥珀酸甲泼尼龙样品3批(批号为M1595、M2225、N0036)由国内某公司提供。

2 方法与结果

2.1色谱条件 色谱柱：DB-Ⅰ石英毛细管柱(100%二甲基聚硅氧烷为固定液，30 m×0.53 mm，0.5 μm)，柱温： 40 ℃维持10 min，以2 ℃/min的速度升温至80 ℃，维持5 min，再以40 ℃/min的速度升温至230 ℃，维持10 min； 气化室：200 ℃；检测器：FID，250 ℃；载气：氮气；分流比：10∶1；流速：1 ml/min；进样量：1 μl。色谱图见图1。

1.甲醇 2.丙酮 3.乙酸乙酯4.N,N-二甲基甲酰胺 5.二甲基亚砜

2.2对照品贮备溶液的配制 精取甲醇126.4 μl(相当于100 mg)、丙酮189.9 μl(相当于150 mg)、乙酸乙酯89.0 μl(相当于80 mg)、N,N-二甲基甲酰胺93.2 μl(相当于88 mg)，置100 ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀。

2.3线性关系考查 精密量取对照品贮备溶液0.5、2.5、4.0、5.0、6.0和10 ml分别置于50 ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，制成一系列浓度的对照溶液；精密量取上述溶液1 μl，注入气相色谱仪，依“2.1”项下色谱条件测定，以对照品溶液浓度为横坐标(C)，对照品峰面积为纵坐标(A)，进行线性回归。结果见表1。

表1 回归方程与线性范围(n=6)

2.4最低检测限 精密量取对照品贮备溶液0.5 ml置50 ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，再逐步稀释。分别精密量取各稀释溶液1 μl注入液相色谱仪，记录色谱图,通过信噪比找出最小检出限,甲醇、丙酮、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的最低检出限分别为5、3、 1.6及4.4 μg/ml。

2.5精密度试验 精密量取“2.2”项下对照品贮备溶液5 ml 置50 ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，共配制6份溶液，分别精密量取1 μl，连续进样，考查精密度。依“2.1”项下色谱条件测定，以峰面积计算，结果甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺峰面积的RSD分别为0.8%、0.5%、1.5%和0.5%(n=6)。

2.6重复性试验 取6份“2.8”项下加入对照溶液0.5 ml的样品溶液，各精密量取1 μl，连续进样，考查重复性。依”2.1”项下方法测定，以峰面积计算，结果甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺峰面积的RSD分别为0.9%、1.0%、0.7%和1.4%(n=6)。

2.7稳定性试验 取样品测定项下对照品溶液及样品溶液，经24 h进样，考查溶液的稳定性。上述溶液中，甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺峰面积基本无变化，表明测定结果24 h内稳定，结果见表2。

2.8回收率试验 精密量取对照品贮备溶液0.4、0.5和0.6 ml各3份, 分置已加入0.5 g样品的5 ml量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，制成含对照品相当于检查限度80%、100%和120%的溶液。另取本品约0.5 g，精密称定，置5 ml量瓶中，用二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，作为回收率测定的空白溶液。同时配制相应浓度的对照品溶液。依”2.1”项下色谱条件测定，按外标法计算回收率，结果见表3-表6。

表2 稳定性试验结果

表3 甲醇回收率试验结果

表4 丙酮回收率试验结果

表5 乙酸乙酯回收率试验结果

表6 N,N-二甲基甲酰胺回收率试验结果

2.9样品测定 取本品约1.0 g，精密称定，置10 ml量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。依”2.1”项下色谱条件测定，检出甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺，结果见表7。

表7 样品测定结果(n=6) %

注：-为未检出

3 讨论

3.1N,N-二甲基甲酰胺为含氮碱性化合物[3]，顶空进样系统对其有所吸附，而其沸点也较高，达到153 ℃，采用顶空试验后发现，不同浓度的对照溶液在采用120 ℃作为顶空瓶平衡温度进样后，N,N-二甲基甲酰胺峰面积线性关系较差，无法取得准确的定量结果，因此不适宜采用顶空方式测定。

3.2由于所检测的有机残留溶剂比较常见，因此本文在色谱柱的选择上主要考查了6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷、5%-二苯基-95%二甲基聚硅氧烷和100%二甲基聚硅氧烷及三种非极性至中等极性的毛细管柱，比较而言，100%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱分离效果比较好，因此选其作为试验的色谱柱。此外对于色谱柱的膜厚对样品的分离也进行了考查，0.5 μm可以满足检测需要。

1 薛志军，邱小忠.COPD患者焦虑抑郁症状与糖皮质激素相关性研究[J].临床肺科杂志，2010，15(9)：1304-1305

2 钱珏,刘文华.毛细管气相色谱法检测头孢西丁钠原料药中的残留溶剂[J].临床合理用药杂志,2011,4(12):14-15

3 张秋菊,裴付军,郭毅.GC法测定盐酸索他洛尔中有机溶剂残留量[J].齐鲁药事,2011,30(7):392-393

2014-03-10

R927.11

A

1006-5687(2014)04-0013-03