杨悦 孔祥英 万红叶 苏晓慧 林娜

地乌三萜皂苷W1对破骨细胞分化和骨吸收功能的影响

杨悦 孔祥英 万红叶 苏晓慧 林娜

目的探讨地乌三萜皂苷类成分W1对体外破骨细胞分化及骨吸收功能的影响。方法3个不同浓度(0.0625，0.125，0.25 μg/ml)的W1与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kB ligand，RANKL)诱导的小鼠单核/巨噬细胞RAW 264.7共孵育7天，抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase，TRAP)染色观察TRAP阳性多核细胞的形成，甲苯胺蓝染色及扫描电镜观察骨吸收陷窝的形成，图像分析计算骨吸收陷窝面积百分比；同3个浓度的W1与RANKL诱导的RAW264.7细胞共孵育24小时后收集细胞上清液，放射免疫法检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的含量；甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)法检测W1对RAW264.7细胞毒性影响。结果RANKL组诱导RAW 264.7细胞形成多量TRAP阳性多核细胞，形成明显的骨吸收陷窝，并诱导TNF-α在RAW264.7细胞上清中异常高表达；与RANKL组相比，3个浓度的W1均能显著减少TRAP阳性细胞数(P<0.01)，显著减少骨吸收陷窝面积(P<0.01，P<0.001，P<0.001)，明显降低TNF-α的表达量(P<0.05，P<0.01，P<0.01)，且未观察到对RAW264.7的细胞毒性。结论W1对由RANKL诱导的体外破骨细胞分化和骨吸收功能有一定的负调节作用。

地乌三萜皂苷W1; 小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7; 肿瘤坏死因子α; 骨吸收

地乌总皂苷是民间治疗风湿疼痛的单验方地乌的主要活性成分群[1]，研究表明其具有抗炎免疫作用，且无明显毒副反应[2-3]。笔者在前期的地乌总皂苷活性成分筛选研究中发现，地乌三萜皂苷W1(以下简称W1)在地乌总皂苷中的含量接近最高，且具有较强的镇痛抗炎活性及较好的骨免疫调节作用。为了有利于地乌治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)机制的阐明及地乌总皂苷的进一步研发，本研究拟通过核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kB ligand，RANKL)诱导小鼠单核/巨噬细胞RAW 264.7细胞建立体外破骨细胞分化模型，观察W1对破骨细胞分化、骨吸收功能及炎性因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)表达的影响,相关结果报道如下。……