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沙眼衣原体Tarp蛋白B细胞表位的预测与鉴定

2014-08-07朱珊丽林晓云薛向阳李文姝张丽芳

温州医科大学学报 2014年6期
关键词:小鼠血清检测

冯 燕,朱珊丽,林晓云,薛向阳,李文姝,张丽芳

(温州医科大学微生物学与免疫学教研室,浙江温州325035)

沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,Ct)型别众多,感染十分普遍,不仅是引起沙眼、致盲的主要原因,还可通过性接触途径引起男性尿道炎和女性宫颈炎[1],因此也是性传播感染(sexuallytransmittedinfections,STIs)的主要病原之一。Ct感染可导致不良妊娠,如异位妊娠、流产等[2],且经抗生素治疗后极易复发。Ct在细胞内完成独特的双相发育周期,即具有代谢惰性的感染性原体(elementarybody,EB)和代谢活跃的非感染性网状体(reticulatebody,RB)。发育周期完成后,EB从细胞中释放并感染邻近的细胞,从而形成循环增殖[3]。

原体和许多其他革兰阴性病原菌一样,通过III型分泌系统(typeIIIsecretionsystem,T3SS)分泌的多种毒力蛋白,即效应蛋白是其主要的致病因素[4]。近年来,学者发现衣原体T3SS的效应蛋白之一—Tarp蛋白,该蛋白在衣原体EB黏附宿主细胞时能诱导EB进入细胞[5],故认为该蛋白可能作为衣原体的受体参与EB的黏附入侵。同时用该蛋白免疫小鼠,发现其能刺激小鼠产生较高滴度的特异性抗体和细胞免疫,而且能显著降低Ct引起小鼠生殖道感染的炎症程度[6],故该蛋白可作为预防和治疗Ct感染的候选疫苗之一。但由于该蛋白分子质量较大(约100kDa),表达制备并保持蛋白的天然构象较为困难,故选择其表位作为研究对象。表位是抗原分子中可与T细胞和B细胞表面受体结合,诱导特异性细胞免疫和体液免疫,从而产生免疫保护作用的一段氨基酸序列。

本研究拟以生殖道感染最常见的E型Ct的Tarp蛋白为基础,利用生物信息学综合分析预测Tarp蛋白的B细胞表位,将预测获得的B细胞表位多肽经人工合成后免疫小鼠,进一步检测其刺激机体产生抗体的能力及抗体与天然Tarp蛋白的结合能力。……

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