茅新华 何 军 彭 卫

(1.中国石油工程建设公司拉克分公司，北京 100120；2.中国石油乌鲁木齐石化分公司，新疆 乌鲁木齐 830019)

0 前言

利用微生物处理石油废水是一项具有广阔前景的高新技术。本实验从石化炼油厂曝气池废水中分离筛选出以石油为唯一碳源的降解菌，初步鉴定了菌株的特性，并研究了影响其降解石油能力的因素，为炼油厂废水处理等应用奠定了基础。

1 概述

1.1 目前研究概况

据统计，迄今为止，已经发现能够降解石油的微生物有200多种，其中细菌有假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、棒杆菌属(Corynebacterium sp.)、微球菌属(Micrococcus sp.)、产碱杆菌属(Alcaligenes sp.)等[1]。已经分离筛选出能降解原油的菌种有：Rhodococcus rhodochrous，Pseudomonas，Alicaligenes，Rhodococcus erythropolis，Acinetobacter，Devouroil等，能够降解芳香烃的菌有：Aeromona，Alicaligenes，Bacillus，Corynebacteria，Flavobacterium，Micrococcus，Mycobacterium，Nocardia，Pseudomonas，Rhodococcus等[2,3]。但这些研究工作，大多以分离鉴定石油烃及其相应化合物的微生物类型和分布出发，以及微生物降解土壤和海洋中原油的能力方面[4-6]，缺乏利用筛选的微生物来处理炼油工业废水等实际应用方面的进一步研究。

1.2 实验技术路线

采集曝气池废水→预处理、制备稀释样品→原油培养基涂布(32℃，培养7-10天)→分离、纯化(纯化培养基)→细菌形态鉴定(形态、革兰氏染色)→初步降解效果实验(研究培养时间、pH、接种量、菌龄对降解率的影响)→菌种保藏 (试管斜面、4℃冰箱)

2 实验方法

2.1 菌种筛选

取曝气池废水1mL，加入灭菌的(121oC、高压蒸汽灭菌15-20min)100mL原油液体培养基中，32oC，转速120r/min摇床培养96h。待培养液混浊后，吸取1mL培养液转接入灭菌的100mL的原油液体培养基中，32oC继续摇床培养96h。取1mL该富集液，按10-1、10-2、10-3的梯度稀释后。分别取0.1mL涂布于原油固体培养基平板上。……