肝癌细胞株HepG2与正常肝细胞株7702差异微小RNA筛选
2014-07-13刘雅歆叶建蔚王建华吕国栋
李 娟, 刘 辉, 刘雅歆, 叶建蔚, 赵 军, 王建华, 温 浩, 吕国栋
(1新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地, 2新疆医科大学基础医学院, 乌鲁木齐 830011;3山东省潍坊市中医院, 山东 潍坊 261000)
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,具有起病隐匿、恶性度高、进展迅速、侵袭性强、易转移、预后差、病死率高等特点,严重危害人类健康[1]。微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一种由19~25个核苷酸组成的内源性单链非编码RNA[2]。研究显示 miRNA参与肝细胞癌的恶性转变过程,如恶性增殖、复发转移、凋亡抑制等[3-4]。进一步研究发现多种 miRNA通过调节其靶基因而参与细胞生物程序调控,间接发挥癌基因和抑癌基因的功能[5]。
miRNA基因芯片是一种高通量的miRNA研究工具,在肿瘤研究领域中具有非常重要的价值,已广泛用于肝癌[6]、神经母细胞瘤[7]、胰腺癌[8]、肺癌[9]和食管鳞状细胞癌[10]等多种恶性肿瘤的致病机制研究。人肝癌细胞株HepG2和人正常肝细胞株7702同是肝细胞来源,其组织结构具有一定的相似性[11],被广泛应用于肝癌研究,但尚未见二者差异miRNA的相关报道。本研究运用高通量的miRNA微阵列芯片技术对肝癌细胞株HepG2和癌旁细胞株7702的miRNA表达谱进行分析,并通过实时荧光定量(RT-qPCR)对其进行验证,以期为寻找肝癌治疗的新靶点提供有效的途径。
1 材料与方法
1.1细胞株来源人肝癌HepG2细胞株和癌旁7702细胞株由新疆医科大学第一附属医院省部共建重点实验实验室保存。
1.2主要仪器与试剂ND-1000 型微量紫外分光光度计(美国NanoDrop公司……
