MicroRNA 122促进吉西他滨对体外非小细胞肺癌细胞系A549的杀伤作用
2014-07-07马德宾杨俊兰史国兵韩雅玲张志远沈阳军区总医院辽宁沈阳006解放军总医院肿瘤内科北京00853
马德宾,冯 帆,张 帆,杨俊兰,史国兵,韩雅玲,张志远沈阳军区总医院,辽宁沈阳 006;解放军总医院 肿瘤内科,北京 00853
MicroRNA 122促进吉西他滨对体外非小细胞肺癌细胞系A549的杀伤作用
马德宾1,冯 帆1,张 帆2,杨俊兰2,史国兵1,韩雅玲1,张志远1
1沈阳军区总医院,辽宁沈阳 110016;2解放军总医院 肿瘤内科,北京 100853
目的探讨microRNA 122(miRNA122)对细胞毒性化疗药吉西他滨对体外杀伤非小细胞肺癌细胞株的影响。方法利用脂质体转染miRNA122的表达载体;CCK-8测定系列浓度梯度吉西他滨检测对非小细胞肺癌细胞株A549的抑制率,计算IC50值;平板克隆实验检测吉西他滨对A549细胞杀伤的影响;流式细胞仪-Annexin/PI双染实验检测吉西他滨诱导A549细胞凋亡率。结果吉西他滨对A549细胞具有明显地体外杀伤作用,其IC50值为(78.65±5.25)nmol/L,转染miRNA122能够上调吉西他滨的活性,其IC50值为(10.26±1.18)nmol/L;流式细胞术结果显示:A549细胞凋亡率诱导转染空载体组为26.24%±1.94%,诱导转染miRNA122组为63.30%±3.96%。miRNA122能够显著上调吉西他滨诱导A549细胞凋亡率。RT-PCR和蛋白印迹实验表明,转染miRNA122能够显著上调A549细胞内miRNA122的表达水平,降低miRNA122靶基因和调控基因的表达水平。结论miRNA122能够上调吉西他滨对非小细胞肺癌细胞系A549的体外杀伤作用。
微小RNA122;非小细胞肺癌;吉西他滨;
MicroRNAs在真核生物系统发育以及细胞增殖调控等生理过程中发挥了重要作用,作为特殊的调节因子,miRNA也能够参与调控多种肿瘤的发生。miRNA122最早被发现与丙型肝炎病毒相关,能够在肝癌细胞增殖调控发挥作用[1-2]。最近的研究显示, miRNA122有可能参与肺癌细胞株的增殖[3]。吉西他滨是一种核糖核苷酸还原酶抑制剂,能够通过阻断DNA合成和修复抑制肿瘤细胞增殖,阻断其周期运转[4]。……
