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单子叶植物不同 Ppc基因构建对烟草转化幼苗生长的影响

2014-06-01张桂芳丁在松

中国烟草科学 2014年6期
关键词:烟草植物

张桂芳,丁在松,赵 明*

(1.中国农业科学院作物科学研究所,农业部作物生理生态重点实验室,北京 100081;2.北京师范大学生命科学学院,北京师范大学学报(自然科学版)编辑部,北京 100875)

单子叶植物不同 Ppc基因构建对烟草转化幼苗生长的影响

张桂芳1,2,丁在松1,赵 明1*

(1.中国农业科学院作物科学研究所,农业部作物生理生态重点实验室,北京 100081;2.北京师范大学生命科学学院,北京师范大学学报(自然科学版)编辑部,北京 100875)

为比较单子叶植物 2 种不同形式(cDNA 和 DNA)的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因(Ppc)在双子叶植物中的表达效果,本研究将单子叶植物稗草(Echinochloa crusgalli)Ppc 基因的 cDNA 和玉米(Zea mays)Ppc 基因的 DNA 全长通过农杆菌介导对双子叶植物烟草(Nicotiana tabacum)进行了遗传转化。GUS 组织化学染色、PCR、RT-PCR 检测结果表明,2 种形式的 Ppc 基因均转入了烟草中;观察分化幼苗生长发育过程发现:转 Ppc基因 cDNA 的烟草分化苗生长发育正常,而转 Ppc 基因 DNA 的分化幼苗在培养过程中叶片白化现象严重,未完成正常生长发育过程,可能是由于完整基因DNA在异源细胞中转录起始位点不正确或拼接错误而导致基因表达异常。由此推测在遗传距离较远的物种间转移 DNA 基因序列全长可能会降低正常表达率。净光合速率(Pn)的测定结果表明,大部分转稗草 Ppc基因烟草的Pn 高于对照,结果初步证明单子叶植物稗草的根型PEPC 酶对烟草的光合作用具有一定的调节作用。

稗草;玉米;烟草;磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶;净光合速率;遗传距离

磷 酸 烯 醇 式 丙 酮 酸 羧 化 酶……

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