徐成坤，阳波，曹建国

(1.南华大学附属第一医院药剂科，衡阳 421001;2.湖南师范大学医学院药理教研室，长沙 410000)

白杨素诱导肝癌Hep3B细胞凋亡机制研究*

徐成坤1，阳波1，曹建国2

(1.南华大学附属第一医院药剂科，衡阳 421001;2.湖南师范大学医学院药理教研室，长沙 410000)

目的 研究白杨素诱导人肝癌Hep 3B细胞凋亡是否涉及激活ROS/ASK1/JNK/Bim信号通路。方法流式细胞术检测细胞凋亡,siRNA转染敲除细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)及Bim基因,SP600125抑制Jun氨基末端激酶(JNK),N-乙酰-L型半胱氨酸(NAC)清除活性氧(ROS),Western blot检测蛋白表达。结果白杨素显著诱导Hep 3B细胞凋亡,同时上调细胞p-ASK1、p-JNK1/2及Bim水平。NAC或SP600125预处理以及ASK1或Bim特异性siRNA转染均能有效拮抗白杨素诱导的细胞凋亡。NAC预处理能抑制白杨素活化ASK1,NAC预孵育或ASK1特异性siRNA转染能抑制白杨素活化JNK,NAC预孵育、ASK1特异性siRNA转染或SP600125预处理均能拮抗白杨素上调Bim蛋白表达效应。结论白杨素可能通过刺激ROS的生成激活ASK1,导致JNK活化,进而上调Bim表达,并最终促进Hep 3B细胞凋亡。

白杨素；肝癌；细胞凋亡；细胞凋亡信号调节激酶1

白杨素(5,7-二羟基黄酮)是从紫葳科植物木蝴蝶中提取的一种对多种肿瘤细胞具有抑制作用的黄酮类化合物。杨小红等[1]研究发现,白杨素通过活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生和持续的c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)激活诱导人肝癌细胞凋亡。然而,白杨素诱导肝癌细胞凋亡的精确分子机制尚未完全阐明。细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)是一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,参与多种生物学过程,包括细胞分化和凋亡[2-3]。已有研究报道ASK1能被包括ROS在内的许多刺激信号活化[4]。……