沈溪明，郭友逢，何欣欣，孙 倩，陈耿标，叶 明，曾韵洁

(中山大学附属第二医院，广州510120)

血管生成拟态(VM)是肿瘤细胞形成的可以运送血液和营养物质的管道样结构，是肿瘤组织内除血管外的另一种血液供应方式。研究发现，VM与肿瘤的进展及患者预后存在密切关系［1］。人类表皮生长因子受体2(HER-2)是判断乳腺癌患者预后的重要因子［2，3］。但HER-2蛋白表达及基因扩增与乳腺癌患者VM的相关性尚不清楚。2012年10月～2013年6月，我们观察了乳腺癌组织中HER-2蛋白表达和基因扩增状态及VM表现，探讨三者之间的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取中山大学附属第二医院病理科存档的乳腺癌石蜡标本200例，均为女性，年龄42～85(50.24 ±9.57)岁，肿瘤直径(3.54 ±0.21)cm。病理类型:乳腺浸润性导管癌176例，乳腺小叶癌18例，乳腺髓样癌4例，其他2例。所有患者术前均未接受化疗或基因治疗。

1.2 观察项目

1.2.1 VM病理改变 采用CD34和PAS双重染色法。常规石蜡切片，脱水后EDTA抗原修复，根据免疫组化Envision二步法常规行 CD34染色，DAB显色，镜下观察内皮细胞着色后终止显色，行PAS复染，蒸馏水冲洗，苏木精染核，封片。VM通道内无内皮细胞衬覆，通道外基底膜PAS染色为阳性。

1.2.2 HER-2蛋白表达 采用免疫组化法。常规石蜡切片，二甲苯脱蜡后梯度酒精脱水，EDTA抗原修复后PBS冲洗，滴加HER-2抗体孵育1 h，PBS冲洗，滴加广谱二抗，常温下孵育30 min，DAB显色，苏木素复染。HER-2蛋白阳性为细胞膜呈棕褐色。细胞膜完整或不完整着色或阳性细胞数＞10%为阳性。细胞膜未着色或阳性细胞数＜10%为阴性。

1.2.3 HER-2基因扩增 采用荧光原位杂交法。常……