李忠英，陈杰山，罗跃中，吴永尧

（1.湖南化工职业技术学院，湖南株洲 412004；2.湖南农业大学生物科学技术学院，湖南长沙 410128）

随着全球石油能源的日趋枯竭及环境污染的加剧，开发新的绿色能源势在必行。燃料酒精替代汽油能源将逐渐成为发展趋势[1-2]。目前，采用燃料酒精生产多采用微生物发酵方式。生产酒精的菌种主要以酵母菌为主，酒精酵母的优劣不仅直接影响发酵率的高低，而且会影响酒精的产量和品质。在酒精发酵时，产生的高浓度酒精和相对较高的发酵温度对产酒率影响较大，高浓度酒精会限制酵母菌的生长繁殖，对酒精发酵产生强烈的抑制作用；而耐高温酵母能减少生产中由于降温所带来的麻烦和费用。因此，高产酒精酵母的选育和发酵工艺的改进是实现酒精浓醪发酵工业化生产的关键[3]。我国也一直将选育优良的酒精酵母菌种和酒精发酵新工艺研究列为重点研究课题。

本项研究从自然界中筛选分离出具有较强温度和酒精耐受性的酵母菌TJ-18并对其进行初步鉴定，旨在筛选培育适用于酒精工业发酵的新菌种。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌样来源

各种腐败水果、葡萄园里土壤、湘天桥菜市场甜酒醪、湘乡燕京啤酒厂酒醪、学生食堂下污水及实验室教学用酵母菌等。

1.1.2 主要培养基

1.1.2.1 富集培养基（L）

含10%酒精麦芽汁（8°Brix）、含14%的酒精麦芽汁（10°Brix）。

1.1.2.2 分离驯化培养基（L）

麦芽汁（8°Brix）及酵母蛋白胨葡萄糖培养基（YPD）：配方：酵母膏1%，蛋白胨2%，葡萄糖2%，若制固体培养基，加入2%琼脂粉。……