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海娜花抗真菌有效成分的提取工艺优化与抑菌效力研究

2014-05-04

中国药业 2014年18期

(江苏省盐城市第一人民医院药剂科,江苏 盐城 224001)

海娜花,即指甲花 Lawsonia inermis L.,为千屈菜科 (Lythtaceae)散沫花属植物,我国汉代《南方草木状》中称其为散沫花,1964年版《维吾尔医常用药材》中称指甲花的维吾尔语名称为Hina或Mihid,还指出其英文名称为Henna。

1 仪器与试药

DF-2型集热式磁力加热搅拌器(上海亚荣生化仪器厂);SHZ-CA型循环水式多用真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司);RE-2000B型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);85-2A型恒温磁力搅拌器(常州博远实验分析仪器厂),LC-20型高效液相色谱仪(日本岛津公司)。95%乙醇、甲醇(分析纯,西陇化工),磷酸二氢铵,磷酸;海娜花粉(天然植物粉,乌鲁木齐印伊海娜有限公司);马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA,生化试剂,广东环凯),RPMI-1640液体培养基(生化试剂,赛默飞世尔);白色念珠菌冻干粉(生化试剂,南京便诊生物科技,CMCC98001);刃天青。

2 方法与结果

2.1 高效液相色谱(HPLC)条件

色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm);流动相:A为30 mmol/L磷酸二氢铵,B为甲醇(用磷酸调pH=3)溶液,梯度洗脱;柱温:30 ℃;进样量:20 μL。

2.2 海娜有效成分提取方法优化

2.2.1回流提取法

溶剂浓度选择:称量海娜花粉5 g,精密称定,置圆底烧瓶中,分别加入50%,70%,90%乙醇50 mL,于80℃温度下回流提取,每隔1 h取出液体,过滤,残渣继续加入50%,70%,90%乙醇50 mL回流提取,重复上述步骤3次。量取提取液10 mL,40℃减压蒸干,用2 mL HPLC法流动相复溶,过0.22 μm微孔滤膜后,采用HPLC法检测[1]。结果见表1。可见,90%乙醇回流提取时出峰晚,物质的非极性高;用50%乙醇回流提取时出峰早,物质的极性高;而70%乙醇介于两者之间。因此,选择70%乙醇作为优化的回流提取溶剂。

表1 3种不同浓度……

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