高 白，解 娜，薛逢贵，谭 颖，李 雪

（1.海南医学院检验医学系，海南 海口 571199；2.海南医学院病理学教研室海南医学院附属医院病理科，海南 海口 570102）

CD56、CD54在甲状腺病变中的表达及意义

高 白1，解 娜2，薛逢贵2，谭 颖1，李 雪1

（1.海南医学院检验医学系，海南 海口 571199；2.海南医学院病理学教研室海南医学院附属医院病理科，海南 海口 570102）

目的检测CD56、CD54在甲状腺病变组织中的表达情况，探讨CD56、CD54的表达在甲状腺病变鉴别诊断中的作用。方法分别收集海南医学院附属医院病理科73例甲状腺乳头状癌、64例良性病变组织蜡块。将137例石蜡标本制做组织芯片。应用免疫组织化学技术检测CD56、CD54蛋白在甲状腺病变组织中的表达情况。结果CD56在甲状腺乳头状癌组织中大多表达缺失，表达率为14%，在良性甲状腺病变组织中表达率高(92.2%)，两者间表达率差异具有显著统计学意义(P＜0.01)。CD54在甲状腺乳头状癌及桥本氏甲状腺炎组织中表达增高(69.9%vs 75.0%)，呈弥漫阳性表达，这两组间表达差异无统计学意义(P＞0.05)；在其他良性甲状腺组织包括结节性甲状腺肿和滤泡性腺瘤中，CD54表达较低(3.8%)，主要呈散在弱阳性表达，与甲状腺乳头状癌组织相比，其表达差异具有显著统计学意义(P＜0.01)。结论CD56在甲状腺乳头状癌中表达缺失，在甲状腺良性病变组织中表达增高；CD54在甲状腺乳头状癌及桥本氏甲状腺炎中高表达，联合检测CD56、CD54对甲状腺病变的鉴别诊断具有重要作用。

甲状腺乳头状癌；CD56；CD54；组织芯片

甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma，PTC)是甲状腺恶性肿瘤中最常见的组织学类型，与乳头状良性增生、滤泡腺瘤鉴别有时较为困难，部分桥本氏甲状腺炎常合并有甲状腺乳头状癌，因而探索开发能应用于甲状腺癌鉴别诊断的标记物至关重要。

CD56又称为神经细胞粘附分子(NCAM)，多数研究认为CD56在PTC中表达缺失，具有一定的鉴别诊断意义[1-4]，然而也有报道认为CD56在甲状腺乳头状癌中也存在较高的表达率，其鉴别诊断意义不明确[5-6]。CD54即细胞间粘附分子1(ICAM-1)，与CD56同属于粘附分子免疫球蛋白超家族成员，近来有学者发现其在甲状腺乳头状癌组织中高表达[7]，其结果尚需进一步证实。据此，我们扩大病例量，联合检测CD56、CD54，观察其在甲状腺病变中的表达情况，以明确CD56、CD54抗体在甲状腺病变中的鉴别诊断作用。

1 材料与方法

1.1 材料 分别收集海南医学院附属医院病理科档存蜡块137例，包括73例甲状腺乳头状癌、28例结节性甲状腺肿(含17例甲状腺乳头状良性增生)、24例腺瘤、12例桥本氏甲状腺炎组织蜡块。甲状腺乳头状癌组织材料中女性56例，男性17例，患者年龄21～74岁，≥45岁者34例，＜45岁者39例，平均32岁。其他病变中女性51例，男性13例，患者年龄13～86岁，≥45岁者39例，＜45岁者26例，平均37岁。所有病例均经病理确诊，显微镜下选择有代表性的区域进行标记、取材、制作芯片。

1.2 试剂与方法 小鼠CD56、CD54单克隆抗体，PV-9000通用型二步法免疫组化检测试剂盒，3，3-二氨基联苯胺(DAB)显色液，均为北京中山生物有限公司产品。常规免疫组化两步法染色，每次染色均设有阳性对照、空白对照。阳性对照以已知阳性的甲状腺病变标本为阳性对照，空白对照用PBS代替一抗作为空白对照。

根据实验研究的目的和需要，受体蜡块设计为18×12点阵。光镜下选择HE标本中适宜的样本位置，对照相应的供体蜡块，每个标本取两点。把各组样本的点阵按顺序排放，设阵列孔的左上方第一排第一个孔为空白标记，以免混淆方向。137个蜡块制作成两个组织芯片。免疫组化及组织芯片制作具体操作步骤见应用文献[8]。

1.3 统计学方法 所有统计均由SPSS18.0统计软件完成。所有免疫组化阳性判定以记数资料进行四表格χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD56在甲状腺病变中的表达情况 CD56在甲状腺乳头状癌及滤泡腺癌组织中大部分表达阴性，仅个别病例弱阳性表达(14%，10/73)。在其他良性甲状腺组织中表达率高，弥漫强阳性(92.2%，59/64)。 CD56在甲状腺腺癌与甲状腺其他良性病变中的表达率比较差异具有显著统计学意义(P＜0.01)，见表1和图1。

2.2 CD54在甲状腺病变中的表达情况 CD54在绝大部分甲状腺乳头状癌中强阳性表达(69.9%，51/73)，在桥本氏甲状腺炎中也存在较高的阳性表达(75.0%，9/12)，而在其他甲状腺良性病变中表达率相对较低，如结节性甲状腺肿中未见明确表达(0，0/28)，仅在个别腺瘤组织中有少许散在弱阳性的表达(8.3%，2/24)。CD54在甲状腺乳头状癌与结节性甲状腺肿、滤泡性腺瘤中的表达差异有统计学意义(69.9%vs 3.8%，P＜0.01)。CD54在甲状腺乳头状癌与桥本氏甲状腺炎中的表达差异无统计学意义(69.9% vs 75.0%，P＞0.05)，见表1和图1。

2.3 CD56、CD54蛋白在同一甲状腺病变组织中的表达情况 甲状腺乳头状癌病变中CD56、CD54的表达模式主要为CD56-/CD54+(49/73，67.1%)，而结节性甲状腺肿、滤泡性腺瘤及桥本氏甲状腺炎中不存在这种表达模式，这种组合性表达在甲状腺乳头状癌与良性病变中差异有显著统计学意义(P＜0.01)，见图1。

表1 CD56、CD54在各种甲状腺组织中的表达情况（例）

图1 CD56、CD54在甲状腺病变中的表达（SP法）

3 讨论

甲状腺乳头状癌是头颈部常见的一个恶性肿瘤，典型的形态学易于诊断，但在部分甲状腺病变中可以见到假乳头或乳头状增生、带有毛玻璃样核改变的腺瘤样增生结节，形态学上与甲状腺乳头状癌常难以区别；而良、恶性甲状腺疾病的误诊将造成患者治疗、精神上的巨大损失，因而寻找甲状腺良、恶性病变的鉴别标记物具有重要的意义。

CD56又称为神经细胞粘附分子(NCAM)，属于免疫球蛋白超家族，正常表达于神经元、星形细胞和自然杀伤细胞等[2]。在多种肿瘤，如神经内分泌肿瘤、NK/T细胞淋巴瘤、骨髓瘤等肿瘤中表达。有研究显示，CD56在甲状腺良性增生病变中表达增高，但在甲状腺乳头状癌中存在失表达的现象，可能与甲状腺癌转移潜能和预后差相关。进一步的研究表明CD56的失表达可作为甲状腺乳头状癌的鉴别诊断要点[3-4]，但也有学者持相反的意见[5-6]。

CD54即细胞间粘附分子(ICAM-1)，也是免疫球蛋白超家族中的一个成员，它可与整合素家族成员结合，参与炎症、变态反应等促进炎症的发生与发展。甲状腺病变中，桥本氏甲状腺炎(HT)被认为是一种自身免疫性疾病，多数报道认为HT的滤泡细胞上有CD54的较高水平表达[9-10]；近来也有学者指出CD54在浸润性PTC中存在一定的高表达率[7]，能否作为独立的预后因素及诊断依据尚需更多的数据支持。

为确认CD56、CD54在甲状腺病变诊断中的作用，我们收集了137例甲状腺病变组织，含73例甲状腺乳头状癌组织，以保证样本数量的统计学意义。采用组织芯片技术预防组织标本处理的不一致性，多批次重复实验结果。

与常规组织切片相比，组织芯片(Tissue chip)具有以下特点：①同时对多个样品进行分析，不仅提高工作效率，还节省大量的材料和试剂；②在同一张芯片上同时对不同的材料进行检测，避免因检验时间的先后及其他人为因素而造成的误差，极大地改善了实验条件的同质性，从而提高检测结果的可比性；③设计的灵活性大，既可将不同组织的标本列阵于同一块芯片上，也可将同种组织不同病理阶段的标本列阵在同一块芯片上。

我们的实验结果发现，CD56在73例PTC的仅小部分病例存在阳性表达，且阳性表达部位位于癌组织与正常组织交界处。癌旁良性甲状腺组织、HT、FA等良性病变CD56多呈弥漫阳性表达，且表达率高，结果与文献报道基本一致。CD54在大多数甲状腺乳头状癌中呈现弥漫强阳性表达，桥本氏甲状腺炎中也有较高的表达率，但在PTC与HT间CD54的表达率无显著差异，而在结节性甲状腺肿、腺瘤中几乎无阳性表达。

形态学不典型病变中采用单个抗体的表达来鉴别诊断存在较大的风险，而采用抗体套餐的方法可降低此种风险。本研究发现中，在甲状腺PTC中CD56表达缺失、CD54表达增高的病例有49例(49/73，67.1%)，良性病变不存在这中组合表达模式(P＜0.01)。

总之，CD56在甲状腺乳头状癌组织中表达缺失，CD54在甲状腺乳头状癌中表达增高，联合应用CD56、CD54对甲状腺良恶性病变诊断的鉴别具有重要作用。

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Expressions of CD56and CD54in thyroid diseases tissues.

GAO Bai1,XIE Na2,XUE Feng-gui2,TAN Ying1,LI Xue1.

1.Department of Laboratory Medicine,Hainan Medical University,Haikou 571159,Hainan,CHINA;2.Department of Pathology,Hainan Medical University,the Affiliated Hospital of Hainan Medical University,Haikou 570102,Hainan,CHINA

ObjectiveTo detect the expression levels of CD56and CD54in different thyroid lesions,and discuss the application of CD56and CD54in the differential diagnosis of thyroid lesions.MethodsParaffin samples including 73 cases of papillary thyroid carcinoma(PTC)and 64 cases of thyroid benign hyperplasia tissues from pathology department of Hainan medical college affiliated hospital were collected to be made as tissue chips.And then immunohistochemical techniques were applied to detect the expression levels of CD56and CD54in thyroid lesions.ResultsThe expression level of CD56in benign tissue was higher than that in PTC(92.2%vs 14%,P＜0.01).Compared with the groups of nodular goiter and follicular adenoma,the CD56positive expression rate in PTC was higher with a significant difference(69.9%vs 3.8%,P＜0.01).However,there was no difference in the positive expression rate of CD56between PTC and Hashimoto's thyroiditis(69.9%and 75.0%,P＞0.05).ConclusionWith lower expression of CD56in PTC rather than in benign tumor and higher expression of CD54in PTC and Hashimoto's thyroiditis,the combined detection of CD56and CD54might contribute to differential diagnosis of the thyroid diseases.

Papillary thyroid carcinoma;CD56;CD54;Tissue Chip

R581

A

1003—6350（2014）24—3720—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.24.1449

2014-06-03)

海南省自然科学基金(编号：811206)；海南医学院大学生创新性实验项目(编号：201105)

解 娜。E-mail：68001358@qq.com