高婧宇梁克伟李鹏飞王天华贾士友邹广发

（1 大庆市公安局刑事技术支队 黑龙江 大庆 163000；2 中国刑警学院 辽宁 沈阳 110035；3 苏州市公安局刑警支队 江苏 苏州 210000）

“502”胶显现指纹后对脱落细胞DNA提取的影响研究

高婧宇1梁克伟2李鹏飞3王天华1贾士友1邹广发1

（1 大庆市公安局刑事技术支队 黑龙江 大庆 163000；2 中国刑警学院 辽宁 沈阳 110035；3 苏州市公安局刑警支队 江苏 苏州 210000）

探讨“502”胶对指纹脱落细胞DNA检验的影响。对60份不同材质上指纹捺印样本进行DNA检验并比较数据结果。不同材质上指纹捺印样本经过“502”熏显后采用M48磁珠提取法仍可获得STR分型。“502”胶未对检材的DNA含量及检出有显著影响。

“502”胶 指纹 M48磁珠法 DNA提取

人类的指纹终生不变，没有两个完全相同的指纹，是世界上公认的也是最重要的个体特征之一，被广泛应用于刑事侦查和保密工作之中。非渗透性客体上很容易获得指纹，但是完整的指纹因为保存条件不同有时停留时间很短，往往得到的是不完整的指纹，给技术工作带来困难。

人类的DNA分析是将分子生物学方法应用于法医学领域，对案件所涉及的生物检材的DNA进行分型，达到个人识别或亲子鉴定的目的。现代研究显示：由于摩擦、接触，指纹中也存在脱落细胞，也可以获得指纹的DNA分型结果。指纹的承受客体一般分为渗透性、非渗透性、半渗透性客体。非渗透性客体表面的汗液手印的显现常应用“502”胶显现技术。“502”胶是一种瞬间黏合剂，主要成分是α-氰基丙烯酸乙酯。“502”胶在常温下易挥发，遇到汗液手印时，在水、氨基酸及弱碱的引发下，可以进行单体聚合，在手印纹线上形成白色固体状聚合物，从而将手印显现出来。该熏显方法对某些半渗透性客体上的手印显现也适用。常用显现方法有冷熏法、加热熏显法、真空熏显法。

在实践工作中公安技术人员常常陷入两难的境界，显示指纹又怕提不了DNA，先提DNA又破坏了指纹。本实验采用Chelex-100法及M48磁珠法分别进行前期提取，研究非渗透性客体表面的指纹经“502”胶显现后是否对DNA的检出造成影响。

1 材料与方法

1.1 样本

非渗透性客体——塑料薄膜上指纹捺印样本30份，半渗透性客体——纸张上指纹捺印样本30份，各取15份经公安部物证二所的AFC-1L型502自动熏显柜加温加湿熏显后备检，其余各15份不做熏显原物备检。

1.2 主要试剂与仪器设备

5%Chelex-100溶液；2mg/ml蛋白酶K溶液；M48磁珠 DNA提取试剂盒 （德国 QIAGEN）；Identifiler®Plus Kit试剂盒（美国ABI公司）；9700型扩增仪（美国ABI公司）；3130XL型基因分析仪（美国ABI公司）。

1.3 方法

每份检材取相同两份，分别放入0.5ml和1.5ml的离心管中，分别用Chelex-100法和M48磁珠法提取模板DNA。

1.3.1 Chelex-100法

每个样本离心管加入5%Chelex-100溶液30μL和2mg/ml的蛋白酶K溶液10μL，56℃孵育2小时（期间震荡多次）；漩涡震荡10s；13000r/min离心3min；4℃保存待扩增用。

1.3.2 M48磁珠法

每个样本离心管加入190μL 190裂解液G2和10μL蛋白酶 K溶液 （10mg/ml），漩涡震荡10s，56℃孵育2小时（期间震荡多次）；13000r/min离心5min；转移200μL上清到1.5ml样品管中；加入1mlMTL和30μL磁珠，混匀，置于摇匀架上摇匀吸附 15min；磁力架吸附磁珠，弃上清；加入500μLMW1溶液摇匀，磁力架吸附磁珠去上清；加入500μL80%的乙醇溶液摇匀，磁力架吸附磁珠去上清；重复80%乙醇洗涤3次，磁力架吸附磁珠弃上清；将离心管开盖置于65℃加热块上烘干；加入20μL超纯水混匀磁珠，65℃加热10min，期间震荡2～3次；将离心管置于磁力架上吸附磁珠，取上清液置于新管中4℃保存待扩增用。

图1 “502”熏显后的检材样本DNA分型

图2 未熏显的检材样本DNA分型

1.3.3 STR扩增及产物检测

将上述两种方法提取的模板DNA分别取适量DNA，用Identifiler®Plus Kit试剂，10μL PCR反应体系进行扩增，用3130XL型基因分析仪进行STR分型。

2 结果与讨论

2.1 结果

未经“502”熏显的塑料薄膜及纸张上的指纹检材Chelex-100法均未获得STR分型，M48磁珠法均可获得STR分型；经过“502”熏显的塑料薄膜及纸张上的指纹检材Chelex-100法均未获得STR分型，M48磁珠法均可获得STR分型。

2.2 讨论

通过实验可见，对于本次实验所选的非渗透客体和半渗透性客体上的指纹捺印样本，无论是否经过熏显，Chelex-100法均无法获得STR分型，而M48磁珠法均能够获得STR分型。由此可见，Chelex-100法不适用于提取量小体微的指纹检材，该类检材可考虑使用M48磁珠法提取，并在复合扩增时适当调整模板DNA的用量及体系以获得较好的分型数据。从图谱的峰值结果来看，经“502”熏显后的检材样本DNA的含量较未经熏显的没有显著差异，均能获得理想的STR分型，“502”胶未对检材的DNA含量及检出造成影响。

在实际办案的现场勘查及物证检验过程中，“502”胶显现技术是运用的十分广泛的一种熏显技术，尤其对于非渗透性客体及半渗透性客体，但如果得到的指纹是凌乱、重叠的，便无法利用痕迹检验技术比对嫌疑人，通过本实验对经“502”胶显现后指纹样本检验的验证，经过“502”熏显的指纹样本仍可以考虑通过DNA检验获得STR分型，利用DNA数据库比对嫌疑人或认定嫌疑人，固定证据链，充分利用DNA靶向性作用，最大限度利用物证，发挥破案作用。

[1]郑秀芬.法医DNA分析[M].北京：中国人民公安大学出版社，2002.

[2]张书杰.痕迹检验学[M].北京：中国人民公安大学出版社，2007.

（责任编辑：于 萍）

DF795

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2013-12-19

公安部应用创新计划项目（编号：2011YYCXXJXY122）。

高靖宇（1985-），女，黑龙江大庆人，大庆市公安局刑事技术支队法医师，本科，主要从事法医物证检验的研究。