黄千贻 李慕军江 莉 吴惠梅

广西医科大学第一附属医院生殖中心（南宁 530021）

·研究简报·

血小板活化因子和A23187对精子顶体反应的影响

黄千贻 李慕军*江 莉 吴惠梅

广西医科大学第一附属医院生殖中心（南宁 530021）

顶体反应（AR）是精子受精过程中的一个必要过程。在IVF或体内自然受精过程中，精子的AR是由透明带糖蛋白受体诱发的[1]，只有透明带诱发的AR才具有重要生理意义。但是目前无法分离出足够的此类物质以常规测定精子顶体功能并应用于诊断，所以需要研究天然AR激动剂的替代物及建立最佳诱导AR体系，这样诱导的AR才更符合生理要求。已知大量的内源性因子可以调节精子生育的潜能，其中包括血小板活化因子（platelet-activating factor，PAF）。有研究表明，PAF除有血小板激活功能外，其还能诱导动物精子体外获能和发生顶体反应[2,3]。本实验采取钙离子载体（A23187）诱导人精子AR作为阳性对照组，以探讨PAF对人精子AR的影响，为寻求天然AR激动剂的替代物及建立最佳诱导AR体系提供有力的理论依据，同时为不育症的诊治开辟一条新的途径。

材料方法

一、试剂准备

1. PAF贮存液：0.3mL PAF溶液稀释于114mL氯仿和甲醇的混和液中（氯仿:甲醇为1:4），配成终浓度为10-5mol/L的溶液，分装后储存于-20℃备用。

2. FITC-PSA贮存液：2mgFITC-PSA溶于20mL PBS（pH值7.4），1mL分装，4℃避光保存。

3. A23187：1mgA23187溶解于1mL DMSO中，配成终末浓度为1mg/mL溶液，少量分装后-20℃避光保存备用，此过程避光操作。

4. 荧光DNA粘合染料（Hoechst33258，H258）：取1mg溶于50mL PBS（pH值7.4）中，配成终末浓度为100μg/mL的溶液，分装后-20℃避光保存备用。

二、样本和精液制备

32例为接受体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗患者，女方为继发不孕患者，男方为健康且曾使女方怀孕患者，精液常规各项指标均在正常范围（符合WHO人类精液分析标准2001年）。……