（郑州市儿童医院 检验科，河南 郑州 450000）

细胞支原体污染清除方法比较及清除后的应用

钱锦

（郑州市儿童医院 检验科，河南 郑州 450000）

目的 探讨使用几种支原体清除方法后，细胞支原体清除效果及所制备抗体应用于相应平台的对比。方法 选用 4 种方法进行清除支原体。结果 通过 PCR 法鉴定，只有清除剂法及实体瘤法可清除支原体感染。结论 杂交瘤细胞清除支原体感染后，制备所得抗体应用于相应平台可见，清除剂法对细胞损伤较大，抗体相应功能下降；而实体瘤法教温和，抗体相应功能保持较完好。

支原体；杂交瘤细胞；抗体

支原体是一种大小仅为0.2～0.3 μm，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22～0.45 μm）的原核生物。在细胞培养过程中，支原体感染发生率达到30%～60%，因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题[1]。当细胞（特别是传代细胞）被支原体污染是很普遍的问题，做好支原体污染的防治工作，是保证实验工作顺利进行的重要一环[2]。细胞被支原体感染后，细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变，而细胞的生长率一般并未发生显著的影响，因而细胞被支原体污染一般难以察觉。当污染严重时，可导致细胞生长缓慢甚至凋亡。本文对传代培养中的杂交瘤细胞污染支原体采用几种方法进行清除试验，将清除支原体后细胞进行制备抗体，应用于相应平台，并取得一定效果。

1 材料与方法

1.1 材料：①试剂及动物：支原体污染检测试剂盒购自上海依科赛（规格：MB000-1392；批号：120917）支原体清除剂Myco-1 Myco-2 Myco-3购自Applichem公司（货号及规格A5222_0020；……