邓丽群 沈法荣 金红峰 王欢

SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离及5-氮胞苷对其的诱导分化作用

邓丽群 沈法荣 金红峰 王欢

目的 探讨SD大鼠骨髓间充质干细胞（SD-MSCs）体外分离的方法条件、生物学特性及5-氮胞苷对其的诱导分化作用。 方法 采用全骨髓贴壁法分离培养SD-MSCs，进行形态学观察，绘制生长曲线，流式细胞仪对其细胞周期进行分析，并通过成脂肪诱导鉴定，给予5-氮胞苷进行诱导分化，通过免疫组化和蛋白免疫印迹法,观察其对超极化激活环核苷酸门控的通道蛋白(HCN2）表达情况。 结果 SD-MSCs以长梭形和多角形为主，呈放射状集落生长，细胞生长曲线呈S形，增殖能力比较活跃。成脂肪诱导后，细胞胞质内有大量橙红色脂滴形成。不同浓度的5-氮胞苷对SD-MSCs进行诱导分化后，7.5、10、12.5μmol/L5-氮胞苷诱导的HCN2表达阳性强度较高，其中10μmol/L的5-氮胞苷诱导24h的SD-MSCs HCN2表达强度最高。 结论 全骨髓贴壁法能够有效分离纯化增殖SD-MSCs，5-氮胞苷能够诱导其分化为HCN2表达阳性的细胞。

骨髓间充质干细胞 全骨髓贴壁法 5-氮胞苷

骨髓间充质干细胞（MSCs）是一类存在于骨髓中的干细胞，它不仅可以为造血干细胞（HSC）提供基质环境促进HSC增殖，而且也可以在体内外适当的刺激下诱导分化成不同类型的细胞[1]。5-氮胞苷可以降低细胞DNA的甲基化水平，进而与MSCs向心肌细胞分化的特异启动基因上的阻遏蛋白相结合[2]，有可能将MSCs定向分化，甚至有可能分化为具有起搏功能的细胞，从而实现生物起搏的功能。起搏细胞膜上存在一种超极化激活环核苷酸门控的通道蛋白（HCN），其中的HCN2是细胞是否具有起搏功能的一个重要的标志。……