孟祥丽，赵玉佳，徐艳敏

(1.牡丹江医学院 红旗医院,黑龙江 牡丹江 157011； 2.牡丹江医学院 药学院,黑龙江 牡丹江 157011)

乌腺金丝桃(HypericumattenuatumChoisy.)，别名赶山鞭、小金丝桃、小旱莲，为多年生草本，属藤黄科金丝桃属(HypericumL.)植物。乌腺金丝桃，为民间常用中草药，味苦，性平，有止血、镇痛、通乳作用，主治咯血、吐血、子宫出血、风湿关节痛、神经痛、乳汁缺乏、乳腺炎等；外用治创伤出血、痈疖肿毒[1]。已有文献报道从乌腺金丝桃中分离出槲皮素(quercetin)、异槲皮苷(isoquercitrin)、槲皮苷(quercitrin)及金丝桃苷(hyperin)[2]等黄酮类成分。黄酮类化合物不仅有平喘、止咳、祛痰、镇痛、降压、抗过敏等作用[3]，也具有抗抑郁、抗肿瘤及抗艾滋病的作用[4]。本文采用比色法测定了黑龙江省3个产地乌腺金丝桃不同物候期地上全草的总黄酮含量。考察乌腺金丝桃不同生境、不同采收期对总黄酮含量的影响。以总黄酮为技术指标筛选乌腺金丝桃药材的采收期，确定黄酮含量最高的产地。对乌腺金丝桃的开发利用提供指导。

1 实验材料、仪器与试剂

1.1实验材料乌腺金丝桃分别于花期、果期、果熟期，采于佳木斯市猴石山、七台河市勃利县通天一林场、鹤岗市萝北县廿里河林场。凭证标本存于佳木斯大学药学院药用植物及生药学标本陈列室。

1.2实验仪器FA2004电子分析天平(上海恒平科学仪器有限公司)；KQ5200超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。

1.3试剂所用试剂均为分析纯。芦丁标准品(中国食品药品检定研究院)。

2 实验方法

将不同产地、不同时期的乌腺金丝桃地上全草分别粉碎成粗粉。采用比色法测定总黄酮的含量。

2.1标准曲线的绘制

2.2稳定性试验精密吸取芦丁95%乙醇溶液(浓度0.234 mg/mL)2 mL，按标准曲线项下操作，加入显色剂后，每隔10 min测定其吸收度，试验表明：比色液在1小时内稳定。(RSD%=0.19%)

2.3精密度试验精密吸取芦丁95%乙醇溶液(浓度0.234 mg/mL)2 mL，按标准曲线项下操作，加入显色剂后，连续测定 5次，结果 RSD为0.627%，表明精密度良好。

2.4样品测定准确称量0.2 g样品粗粉(每样称3份)，石油醚冷浸过夜，索氏提取器提取至无色，药渣阴干后， 95%乙醇超声提取20 min/次，每次15 mL共3次，合并滤液移至50 mL容量瓶，定容，摇匀后，从中吸取适量(使A值在0.2～0.8之间)溶液至25 mL容量瓶，按标准曲线项下操作显色后，于波长504 nm处测定吸收度，并按回归方程计算含量。

分别精密称取同批样品6份，上述方法进行测定，结果RSD为2.03%，重复性良好。

2.5回收率试验精称乌腺金丝桃样品(猴石山产，果期)约1g共3份，分别向其中加入芦丁对照品10 mg，按样品测定方法进行提取、测定，按回归方程计算芦丁含量，并计算百分回收率，平均回收率为98.32%，RSD%为1.09%(n=3)。

3 实验结果

乌腺金丝桃中总黄酮在花盛期含量最高；不同产地中以勃利县总黄酮含量最高。见表1、图1：

表1 乌腺金丝桃地上全草黄酮成分含量

图1 乌腺金丝桃不同产地、不同物候期总黄酮含量图

4 结论与讨论

对不同产地、不同物候期乌腺金丝桃总黄酮的测定得知：总黄酮在花盛期含量最高，在果熟期含量最低；相对来说，勃利县通天一林场采收的药材总黄酮含量最高。因此：以总黄酮为技术指标筛选乌腺金丝桃药材的产地、采收期，最好在花盛期(7月末至8月中旬)采收，以勃利县通天一林场含量最高。

金丝桃属植物具有复杂多样的化学成分，国内外对其化学成分及药理方面的研究很多。其中研究最多的是苯并二蒽酮化合物(Naphthodianthrones)包括金丝桃素(Hyperein)、 伪金丝桃素(Pseudohypericin)和黄酮类。本文选择总黄酮作为筛选其用药部位和采收期的技术指标。比较了不同入药部位、不同采收季节对活性成分的影响，进一步规范了乌腺金丝桃药材的药用部位采收季节，得到一种适用于乌腺金丝桃药材的采收方法，对乌腺金丝桃的开发具有指导意义。

参考文献：

[1] 朱有昌.东北药用植物[M].哈尔滨：黑龙江科学技术出版社,1989:743-747.

[2] Makovets’ka OI. Biologically active substances isolated from Hypericum attenuatum Choisy[J]. Ukr Biokhim Zh 2000,72(3):110-113.

[3] 潘映红.国产金丝桃属有效成分研究概况.中药材[J].1993，16(8)：40-42.

[4] Weber N D.The antiviral agent hypericin hasinvitroactivity against HSV-1 through nonspecific association with viral and cell armebranes[J].Antiviral Chemistry and Chemotherapy,1994,5:90183-90204.