罗先真+蔡朝晖+郑斌

摘要：利用苦菜[Patrinia villosa （Thunb.） Juss.]种子和插条进行繁殖试验，对繁育成活的幼苗生长情况进行比较分析。结果表明，种子经湿冷处理，去种皮在变温条件下培养皿法播种发芽率最高，为56%；带顶芽插条经过生根粉处理在沙土中扦插成活率和平均生根数最高，分别为83%和9.7根/株；插条繁育幼苗成苗后后期生长快，生长势明显好于种子繁育的幼苗。

关键词：苦菜[Patrinia villosa （Thunb.） Juss.]；种子繁殖；扦插繁殖；成活率

中图分类号：S647 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）01-0093-04

Studies on Propagation Techniques of Patrinia villosa

LUO Xian-zhen，CAI Zhao-hui，ZHENG Bin

（College of Nuclear Technology， Chemistry and Biology， Hubei University of Science and Technology， Xianning 437100， Hubei， China）

Abstract： Propagation experiment with seeds and cuttings of Patrinia villosa was conducted to analyze the growth of the surviving seedlings. Results showed that seeds removed episperm by the wet cold pretreatment had the highest germination rate of 56% under the variable temperature condition. Cuttings with terminal bud had treated by ABT the highest survival rate and average number of root， 83% and 9.7 per plant in sandy soil，respectively. The growth of the seedlings from cuttings was significantly better than that of the seedlings from seeds.

Key words： Patrinia villosa； seed propagation； cutting propagation； survival rate

收稿日期：2013-03-29

基金项目：湖北省教育厅项目（XD20100661）；湖北科技学院大学生科研项目（12010508093）

作者简介：罗先真（1990-），男，湖北黄冈人，2010级在读本科生，（电子信箱）1610840234@qq.com；通讯作者，蔡朝晖（1969-），男，湖北咸宁人，

副教授，（电话）13997539019（电子信箱）34431143@qq.com。

苦菜学名白花败酱[Patrinia villosa （Thunb.） Juss.]，属败酱科（Valerianaceae）多年生草本植物，喜湿润半阴环境，较耐寒，对土壤耐受性较好，但以肥沃的沙质壤土为最佳，通常生于沟边、山坡、树林下，林缘、路边、灌丛及草丛中。自然条件下以扦插和种子繁殖为主。

苦菜含有多种氨基酸、维生素及微量元素，入药有清热解毒、消炎抗菌、利湿排脓、活血行淤、镇心安神等功效，现代医学研究证实其具有促进肝细胞再生，改善肝功能和抗菌、抑制病毒等功效[1]。因此，苦菜是药膳两用的优质野生蔬菜，具有较大的开发利用价值。对苦菜的繁殖方法进行研究，遴选出最优繁殖方式和繁殖条件，对有效利用和开发野生苦菜资源以及规模化繁育栽培具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料

选取咸宁市当地野生苦菜的种子和枝条作为试验材料；生根粉选用四川省简阳市惠农化工厂生产的艾施生根剂（含40%萘乙酸）。

1.2 材料处理

1.2.1 种子处理 种子于2011年11月采集。选取颗粒饱满的苦菜种子进行预处理。干冷处理：将干燥种子放入冰箱内冷藏；湿冷处理：将种子用纱布包裹放在沙土中湿藏，用冬季自然低温处理（2011年咸宁冬季最低温度为-4 ℃），整个过程保持沙土潮湿；以不进行任何处理，室内自然贮藏的作对照；去皮处理：将上述预处理的种子去掉外面硬壳后播种。

1.2.2 插条处理 生根粉处理：扦插前用0.5%的生根粉浸泡插条基部（2 cm）10 min；以不用生根粉处理的作对照。

1.3 方法

1.3.1 种子繁育 2012年3月14日播种。播种时根据种子预处理方式（湿冷处理、干冷处理、室内自然贮藏）分为3组，每组再根据播种的基质分为2组（壤土、沙土）装盆，每组装盆3个，每盆播种200颗。然后从每组中抽取一个花盆在室外自然温度、恒温（20 ℃）、变温（20～25 ℃）条件下培养；另选取经过3种预处理苦菜种子各200颗去皮后在培养皿湿纱布上（保持培养过程中纱布湿润）于室温下培养。每周检查和记录一次种子萌发情况。

1.3.2 扦插繁育 2012年7月8日进行扦插繁殖试验。选用壤土和沙土作为扦插基质，分别装好6个花盆备用；剪取保留1个节、保留2个节和带顶芽（保留2个节）的健壮枝条各80根，从每组枝条中各选取40根用0.5%生根粉浸泡10 min，以不做任何处理的枝条作对照。每盆扦插20根。将所有花盆移置树阴下，常规管理。每周检查和记录一次插条生根情况。

插条生根指长出1条（含1条）以上0.5 cm（含0.5 cm）以上的根，插条生根率=（生根插条数/插条总数）×100%；平均生根数=生根总数/生根插条数；平均根长=插条生根总长/插条生根总数；生根力指数=（平均根长×平均生根数）/插条数[2，3]。

1.3.3 苦菜幼苗新生叶片的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白质、核酸含量的测定 叶绿素的含量测定采用研磨提取法[4]；可溶性糖含量的测定采用蒽酮比色法[4]；可溶性蛋白质含量的测定采用紫外吸收法[5]；核酸含量的测定采用紫外吸收法[6]。

2 结果与分析

2.1 种子繁育结果

2.1.1 苦菜种子在不同基质与温度下的发芽率 苦菜种子在不同基质和温度下的萌发情况见表1。由表1可知， 湿冷预处理的苦菜种子沙土播种，控制变温条件20～25 ℃时发芽率最高，为29%；不做任何处理的苦菜种子自然条件下壤土播种发芽率最低，为5%；干冷处理变温条件下沙土播种发芽率也比较高，为25%。表明湿冷处理和沙土有利于种子萌发，可能与苦菜种子需要后熟过程以及沙土有良好的透气性有关。

2.1.2 苦菜种子去种皮室内自然温度下培养的萌发情况 苦菜种子去种皮后在室温下培养的发芽情况见表2。由表2可知，3种预处理后的苦菜种子去种皮后，发芽率与不去皮种子发芽率分别提高了3、9、16个百分点，去种皮后种子发芽率提高明显，说明苦菜种子种皮坚实，一定程度上限制了透水透气，从而限制和影响了种子的萌发；与上述沙土和壤土的所有播种发芽率相比较，发芽率明显提高，表明透气性的差异对种子发芽影响较大。

2.2 扦插繁育结果

2.2.1 插条繁育生根情况 不同插条平均生根数目、平均生根长度、生根率、生根力指数数据见表3。由表3可知，带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插生根率和平均根长最大，分别为83%和3.1 cm；带顶芽插条经过生根粉处理在壤土中扦插的平均生根数最多，为10根，一节插条未经生根粉处理在壤土中的生根率和平均根长均最低，分别为29%和1.6 cm。表明沙土基质和生根粉处理有明显促进生根的作用，带顶芽枝条生根情况明显好于不带顶芽的，二节枝条生根情况明显好于一节的，说明枝条所带芽体数量多少对生根情况有明显影响；带顶芽插条在两种基质中扦插，生根粉处理对生根的影响远小于不带顶芽的，说明顶芽产生生长素明显高于侧芽。

2.2.2 不同处理扦插枝条萌芽和新生根的形态比较 不同处理扦插枝条扦插的萌芽和新生根的形态见图1。由图1可知，从新萌生幼芽和新生根生长状态来看，带顶芽插条生根粉处理壤土扦插成活的幼苗的健壮状况明显好于其他插条，两节插条生根粉处理壤土扦插成苗健壮状况好于一节插条，结果与前述数据分析结果相吻合，同时显示壤土相对于沙土矿质营养比较丰富，有利于幼苗根系发育和幼苗生长。

2.2.3 插条叶片叶绿素含量比较结果 不同处理扦插枝条叶绿素a、叶绿素b和类胡萝素的含量见表4。由表4可知，带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插成活幼苗的叶绿素总含量和类胡萝素含量都最高，一节插条不经过生根粉处理在壤土基质中扦插成活幼苗的叶绿素总含量和类胡萝素的含量最低，同时，带顶芽插条扦插幼苗的叶绿素和类胡萝卜素含量都高于不带顶芽的，两节插条成活幼苗的叶绿素和类胡萝卜素含量也高于一节插条幼苗，说明顶芽有明显促进幼苗生长的作用，顶芽相对于生根粉对幼苗生长的影响更大，芽体越多越有利于幼苗的生长。

2.2.4 不同插条叶片中可溶性糖、蛋白质和核酸的含量比较 不同处理扦插枝条可溶性糖、蛋白质和核酸的含量见表5。由表5可知，带顶芽经过生根粉处理沙土基质扦插的可溶性糖、蛋白质和核酸的含量最高，分别为13.82、0.573、0.140 mg/g， 一节没有经过生根粉处理壤土基质扦插的可溶性糖、蛋白质和核酸含量最低，分别为5.120、0.379、0.031 mg/g。结果与插条生长情况和叶绿素总含量分析结果相吻合。

3 小结与讨论

苦菜生态适应性好，播种、扦插繁育效果好，适宜人工繁育[7]。扦插成活率高，生长快，后期生长状况良好，可提前收获时间。带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插的生根情况最好，叶绿素总含量、核酸、可溶性糖和蛋白质含量均最高，插条经过生根粉处理后有利于插条愈伤组织的形成，从而有利于根的萌生；并且顶芽中存在大量的细胞分裂素可促进生根；相对于生根粉顶芽对后期幼苗生长更有利；沙土基质由于透气性好，氧气含量高，有利于提高插条成活率；插条在形成不定根时，顶芽细胞分裂旺盛，核酸含量高，促进插条生根，成苗后核酸含量高，插条总叶绿素合成增加，促进光合作用合成有机物，可溶性糖、蛋白质含量增加。种子经过湿冷处理，去种皮在变温条件下在培养皿中的发芽率最高，苦菜种子进行湿冷处理的后熟过程能有效提高发芽率，用培养皿法进行播种时虽可以提高种子发芽率，得到比较多的幼苗，但幼苗比较纤弱。在实际生产中可以根据不同需要采取适宜的方式进行苦菜繁殖。

参考文献：

[1] 金水虎，李根有，胡永旭. 白花败酱繁殖技术初步研究[J].中国野生植物资源，2002，21（3）：52-53.

[2] 周晓梅，陈 曦，刘 强，等.不同处理措施对蓝莓嫩枝扦插生根的影响[J].广东农业科学，2012（4）：38-40.

[3] 章志红，蒋联方.植物生长调节剂对栀子扦插生根的影响[J].湖北农业科学，2012，51（5）：934-936.

[4] 朱庆松，张景华，赵海英.杂交兰种间及及杂交后代可溶性糖、可溶性蛋白质及叶绿素含量测定[J].安徽农业科学，2011，39（7）：3858-3860.

[5] 李合生.现代植物生理学[M].北京：高等教育出版社，2000.

[6] 张志良.植物生理学实验指导[M].北京：高等教育出版社，2002.

[7] 王二霞，赵 健，琚争艳，等.苦菜及其研究开发现状[J].食品工业科技，2008，29（10）：272-274.

（责任编辑 王晓芳）

插条生根指长出1条（含1条）以上0.5 cm（含0.5 cm）以上的根，插条生根率=（生根插条数/插条总数）×100%；平均生根数=生根总数/生根插条数；平均根长=插条生根总长/插条生根总数；生根力指数=（平均根长×平均生根数）/插条数[2，3]。

1.3.3 苦菜幼苗新生叶片的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白质、核酸含量的测定 叶绿素的含量测定采用研磨提取法[4]；可溶性糖含量的测定采用蒽酮比色法[4]；可溶性蛋白质含量的测定采用紫外吸收法[5]；核酸含量的测定采用紫外吸收法[6]。

2 结果与分析

2.1 种子繁育结果

2.1.1 苦菜种子在不同基质与温度下的发芽率 苦菜种子在不同基质和温度下的萌发情况见表1。由表1可知， 湿冷预处理的苦菜种子沙土播种，控制变温条件20～25 ℃时发芽率最高，为29%；不做任何处理的苦菜种子自然条件下壤土播种发芽率最低，为5%；干冷处理变温条件下沙土播种发芽率也比较高，为25%。表明湿冷处理和沙土有利于种子萌发，可能与苦菜种子需要后熟过程以及沙土有良好的透气性有关。

2.1.2 苦菜种子去种皮室内自然温度下培养的萌发情况 苦菜种子去种皮后在室温下培养的发芽情况见表2。由表2可知，3种预处理后的苦菜种子去种皮后，发芽率与不去皮种子发芽率分别提高了3、9、16个百分点，去种皮后种子发芽率提高明显，说明苦菜种子种皮坚实，一定程度上限制了透水透气，从而限制和影响了种子的萌发；与上述沙土和壤土的所有播种发芽率相比较，发芽率明显提高，表明透气性的差异对种子发芽影响较大。

2.2 扦插繁育结果

2.2.1 插条繁育生根情况 不同插条平均生根数目、平均生根长度、生根率、生根力指数数据见表3。由表3可知，带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插生根率和平均根长最大，分别为83%和3.1 cm；带顶芽插条经过生根粉处理在壤土中扦插的平均生根数最多，为10根，一节插条未经生根粉处理在壤土中的生根率和平均根长均最低，分别为29%和1.6 cm。表明沙土基质和生根粉处理有明显促进生根的作用，带顶芽枝条生根情况明显好于不带顶芽的，二节枝条生根情况明显好于一节的，说明枝条所带芽体数量多少对生根情况有明显影响；带顶芽插条在两种基质中扦插，生根粉处理对生根的影响远小于不带顶芽的，说明顶芽产生生长素明显高于侧芽。

2.2.2 不同处理扦插枝条萌芽和新生根的形态比较 不同处理扦插枝条扦插的萌芽和新生根的形态见图1。由图1可知，从新萌生幼芽和新生根生长状态来看，带顶芽插条生根粉处理壤土扦插成活的幼苗的健壮状况明显好于其他插条，两节插条生根粉处理壤土扦插成苗健壮状况好于一节插条，结果与前述数据分析结果相吻合，同时显示壤土相对于沙土矿质营养比较丰富，有利于幼苗根系发育和幼苗生长。

2.2.3 插条叶片叶绿素含量比较结果 不同处理扦插枝条叶绿素a、叶绿素b和类胡萝素的含量见表4。由表4可知，带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插成活幼苗的叶绿素总含量和类胡萝素含量都最高，一节插条不经过生根粉处理在壤土基质中扦插成活幼苗的叶绿素总含量和类胡萝素的含量最低，同时，带顶芽插条扦插幼苗的叶绿素和类胡萝卜素含量都高于不带顶芽的，两节插条成活幼苗的叶绿素和类胡萝卜素含量也高于一节插条幼苗，说明顶芽有明显促进幼苗生长的作用，顶芽相对于生根粉对幼苗生长的影响更大，芽体越多越有利于幼苗的生长。

2.2.4 不同插条叶片中可溶性糖、蛋白质和核酸的含量比较 不同处理扦插枝条可溶性糖、蛋白质和核酸的含量见表5。由表5可知，带顶芽经过生根粉处理沙土基质扦插的可溶性糖、蛋白质和核酸的含量最高，分别为13.82、0.573、0.140 mg/g， 一节没有经过生根粉处理壤土基质扦插的可溶性糖、蛋白质和核酸含量最低，分别为5.120、0.379、0.031 mg/g。结果与插条生长情况和叶绿素总含量分析结果相吻合。

3 小结与讨论

苦菜生态适应性好，播种、扦插繁育效果好，适宜人工繁育[7]。扦插成活率高，生长快，后期生长状况良好，可提前收获时间。带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插的生根情况最好，叶绿素总含量、核酸、可溶性糖和蛋白质含量均最高，插条经过生根粉处理后有利于插条愈伤组织的形成，从而有利于根的萌生；并且顶芽中存在大量的细胞分裂素可促进生根；相对于生根粉顶芽对后期幼苗生长更有利；沙土基质由于透气性好，氧气含量高，有利于提高插条成活率；插条在形成不定根时，顶芽细胞分裂旺盛，核酸含量高，促进插条生根，成苗后核酸含量高，插条总叶绿素合成增加，促进光合作用合成有机物，可溶性糖、蛋白质含量增加。种子经过湿冷处理，去种皮在变温条件下在培养皿中的发芽率最高，苦菜种子进行湿冷处理的后熟过程能有效提高发芽率，用培养皿法进行播种时虽可以提高种子发芽率，得到比较多的幼苗，但幼苗比较纤弱。在实际生产中可以根据不同需要采取适宜的方式进行苦菜繁殖。

参考文献：

[1] 金水虎，李根有，胡永旭. 白花败酱繁殖技术初步研究[J].中国野生植物资源，2002，21（3）：52-53.

[2] 周晓梅，陈 曦，刘 强，等.不同处理措施对蓝莓嫩枝扦插生根的影响[J].广东农业科学，2012（4）：38-40.

[3] 章志红，蒋联方.植物生长调节剂对栀子扦插生根的影响[J].湖北农业科学，2012，51（5）：934-936.

[4] 朱庆松，张景华，赵海英.杂交兰种间及及杂交后代可溶性糖、可溶性蛋白质及叶绿素含量测定[J].安徽农业科学，2011，39（7）：3858-3860.

[5] 李合生.现代植物生理学[M].北京：高等教育出版社，2000.

[6] 张志良.植物生理学实验指导[M].北京：高等教育出版社，2002.

[7] 王二霞，赵 健，琚争艳，等.苦菜及其研究开发现状[J].食品工业科技，2008，29（10）：272-274.

（责任编辑 王晓芳）

插条生根指长出1条（含1条）以上0.5 cm（含0.5 cm）以上的根，插条生根率=（生根插条数/插条总数）×100%；平均生根数=生根总数/生根插条数；平均根长=插条生根总长/插条生根总数；生根力指数=（平均根长×平均生根数）/插条数[2，3]。

1.3.3 苦菜幼苗新生叶片的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白质、核酸含量的测定 叶绿素的含量测定采用研磨提取法[4]；可溶性糖含量的测定采用蒽酮比色法[4]；可溶性蛋白质含量的测定采用紫外吸收法[5]；核酸含量的测定采用紫外吸收法[6]。

2 结果与分析

2.1 种子繁育结果

2.1.1 苦菜种子在不同基质与温度下的发芽率 苦菜种子在不同基质和温度下的萌发情况见表1。由表1可知， 湿冷预处理的苦菜种子沙土播种，控制变温条件20～25 ℃时发芽率最高，为29%；不做任何处理的苦菜种子自然条件下壤土播种发芽率最低，为5%；干冷处理变温条件下沙土播种发芽率也比较高，为25%。表明湿冷处理和沙土有利于种子萌发，可能与苦菜种子需要后熟过程以及沙土有良好的透气性有关。

2.1.2 苦菜种子去种皮室内自然温度下培养的萌发情况 苦菜种子去种皮后在室温下培养的发芽情况见表2。由表2可知，3种预处理后的苦菜种子去种皮后，发芽率与不去皮种子发芽率分别提高了3、9、16个百分点，去种皮后种子发芽率提高明显，说明苦菜种子种皮坚实，一定程度上限制了透水透气，从而限制和影响了种子的萌发；与上述沙土和壤土的所有播种发芽率相比较，发芽率明显提高，表明透气性的差异对种子发芽影响较大。

2.2 扦插繁育结果

2.2.1 插条繁育生根情况 不同插条平均生根数目、平均生根长度、生根率、生根力指数数据见表3。由表3可知，带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插生根率和平均根长最大，分别为83%和3.1 cm；带顶芽插条经过生根粉处理在壤土中扦插的平均生根数最多，为10根，一节插条未经生根粉处理在壤土中的生根率和平均根长均最低，分别为29%和1.6 cm。表明沙土基质和生根粉处理有明显促进生根的作用，带顶芽枝条生根情况明显好于不带顶芽的，二节枝条生根情况明显好于一节的，说明枝条所带芽体数量多少对生根情况有明显影响；带顶芽插条在两种基质中扦插，生根粉处理对生根的影响远小于不带顶芽的，说明顶芽产生生长素明显高于侧芽。

2.2.2 不同处理扦插枝条萌芽和新生根的形态比较 不同处理扦插枝条扦插的萌芽和新生根的形态见图1。由图1可知，从新萌生幼芽和新生根生长状态来看，带顶芽插条生根粉处理壤土扦插成活的幼苗的健壮状况明显好于其他插条，两节插条生根粉处理壤土扦插成苗健壮状况好于一节插条，结果与前述数据分析结果相吻合，同时显示壤土相对于沙土矿质营养比较丰富，有利于幼苗根系发育和幼苗生长。

2.2.3 插条叶片叶绿素含量比较结果 不同处理扦插枝条叶绿素a、叶绿素b和类胡萝素的含量见表4。由表4可知，带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插成活幼苗的叶绿素总含量和类胡萝素含量都最高，一节插条不经过生根粉处理在壤土基质中扦插成活幼苗的叶绿素总含量和类胡萝素的含量最低，同时，带顶芽插条扦插幼苗的叶绿素和类胡萝卜素含量都高于不带顶芽的，两节插条成活幼苗的叶绿素和类胡萝卜素含量也高于一节插条幼苗，说明顶芽有明显促进幼苗生长的作用，顶芽相对于生根粉对幼苗生长的影响更大，芽体越多越有利于幼苗的生长。

2.2.4 不同插条叶片中可溶性糖、蛋白质和核酸的含量比较 不同处理扦插枝条可溶性糖、蛋白质和核酸的含量见表5。由表5可知，带顶芽经过生根粉处理沙土基质扦插的可溶性糖、蛋白质和核酸的含量最高，分别为13.82、0.573、0.140 mg/g， 一节没有经过生根粉处理壤土基质扦插的可溶性糖、蛋白质和核酸含量最低，分别为5.120、0.379、0.031 mg/g。结果与插条生长情况和叶绿素总含量分析结果相吻合。

3 小结与讨论

苦菜生态适应性好，播种、扦插繁育效果好，适宜人工繁育[7]。扦插成活率高，生长快，后期生长状况良好，可提前收获时间。带顶芽插条经过生根粉处理在沙土基质中扦插的生根情况最好，叶绿素总含量、核酸、可溶性糖和蛋白质含量均最高，插条经过生根粉处理后有利于插条愈伤组织的形成，从而有利于根的萌生；并且顶芽中存在大量的细胞分裂素可促进生根；相对于生根粉顶芽对后期幼苗生长更有利；沙土基质由于透气性好，氧气含量高，有利于提高插条成活率；插条在形成不定根时，顶芽细胞分裂旺盛，核酸含量高，促进插条生根，成苗后核酸含量高，插条总叶绿素合成增加，促进光合作用合成有机物，可溶性糖、蛋白质含量增加。种子经过湿冷处理，去种皮在变温条件下在培养皿中的发芽率最高，苦菜种子进行湿冷处理的后熟过程能有效提高发芽率，用培养皿法进行播种时虽可以提高种子发芽率，得到比较多的幼苗，但幼苗比较纤弱。在实际生产中可以根据不同需要采取适宜的方式进行苦菜繁殖。

参考文献：

[1] 金水虎，李根有，胡永旭. 白花败酱繁殖技术初步研究[J].中国野生植物资源，2002，21（3）：52-53.

[2] 周晓梅，陈 曦，刘 强，等.不同处理措施对蓝莓嫩枝扦插生根的影响[J].广东农业科学，2012（4）：38-40.

[3] 章志红，蒋联方.植物生长调节剂对栀子扦插生根的影响[J].湖北农业科学，2012，51（5）：934-936.

[4] 朱庆松，张景华，赵海英.杂交兰种间及及杂交后代可溶性糖、可溶性蛋白质及叶绿素含量测定[J].安徽农业科学，2011，39（7）：3858-3860.

[5] 李合生.现代植物生理学[M].北京：高等教育出版社，2000.

[6] 张志良.植物生理学实验指导[M].北京：高等教育出版社，2002.

[7] 王二霞，赵 健，琚争艳，等.苦菜及其研究开发现状[J].食品工业科技，2008，29（10）：272-274.

（责任编辑 王晓芳）