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一个棉花微管结合蛋白基因GhSP1L5的克隆及表达分析

2014-03-21李榕寇伟谭兰贺怡梁卓李鸿彬

生物技术通报 2014年10期

李榕寇伟谭兰贺怡梁卓李鸿彬,2

(1.石河子大学生命科学学院,石河子 832003;2.石河子大学农业生物技术重点实验室,石河子 832003)

一个棉花微管结合蛋白基因GhSP1L5的克隆及表达分析

李榕1寇伟1谭兰1贺怡1梁卓1李鸿彬1,2

(1.石河子大学生命科学学院,石河子 832003;2.石河子大学农业生物技术重点实验室,石河子 832003)

利用RT-PCR技术从处于快速伸长发育时期的棉花纤维组织中克隆得到Spiral1-Like(SP1L5)基因(GhSP1L5),其开放读码框为315 bp,编码105个氨基酸的蛋白质,生物信息学分析表明,GhSP1L5蛋白N端和C端较为保守,并含有SCOP结构域,是典型的微管结合蛋白。进化树分析表明该基因与SP1L5家族基因的亲缘关系较近。构建原核表达载体pET28a-GhSP1L5,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行体外诱导表达,通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,获得分子质量约为12 kD的重组蛋白。QRTPCR结果分析表明GhSP1L5基因在开花后15和20 dpa的纤维组织中表达量较高,在棉纤维发育的其他时期及根、茎、叶组织中表达量较低。

棉花纤维 Spiral1-Like5基因 微管结合蛋白 表达

棉花纤维是全球重要的纺织原料之一,是第一大产天然纤维的作物,具有重要的经济价值,在世界及我国国民经济中均占有十分重要的地位[1,2]。近年来由于我国纺织技术的发展以及国民需求的日益增长,对棉花纤维的品质提出了更高要求,亟待在纤维品质方面进行改良以满足生产生活的需求。纤维的强度和长度是棉花纤维品质中重要的参考指标,细胞的伸长或膨大发育与纤维品质形成密切相关[3]。

微管是构成细胞骨架的重要成分,在维持细胞形态、细胞分裂、细胞运动与运输以及信号转导等方面都发挥着重要的作用[4]。……

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