李国慧，刘瑞花，李贵霞，张丽霞

(1.河北省儿童医院检验科，河北 石家庄 050031;2.河北省老年病医院药剂科，河北 石家庄 050011；3.河北省儿童医院成人科，河北 石家庄 050031)

骨肉瘤，又称成骨肉瘤，是青少年最常见的恶性成骨性肿瘤之一，该瘤恶性程度高，预后极差。以大剂量化疗为主的综合治疗效果并不理想，且不良反应大。苦参碱作为药用植物在我国据文字记载已有2 000多年的历史，目前在医药领域有着广泛的应用，有关苦参碱抗肿瘤作用也受到了人们的广泛关注。本研究初步观察了苦参碱对骨肉瘤MG63细胞生长、增殖的影响，旨在为苦参碱抗肿瘤作用的临床应用提供相应的理论基础。

1 材料与方法

1.1 细胞培养：人骨肉瘤MG63细胞株由河北医科大学第三医院实验中心保存，提供使用。MG63细胞生长在含10%胎牛血清的DMEM培养基37℃饱和湿度5%CO2培养箱中培养。待细胞进入对数生长期后用于实验。

1.2 倒置相差显微镜下观察：将MG63细胞接种于放有盖玻片的培养皿中培养，待细胞生长至对数生长期，换用含有不同浓度苦参碱的新鲜培养基，定时镜下观察并照相。

1.3 四甲基偶氮唑蓝实验：取对数生长期A21-2细胞经胰酶消化后，调整细胞浓度为1×104/mL，每孔200μL接种于96孔板，培养24h后吸去培养液，加入含药的培养液，分别设对照组(不含药培养基)和不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0g/L)苦参碱组，每组设10个复孔。分别培养48、72h，培养结束前4h每孔加入20μL四甲基偶氮唑蓝(5g/L)，37℃继续孵育4h(药物继续作用)，吸去培养液，每孔加入150μL DMSO，在振荡器上振荡15min，用全自动酶标仪(测定波长492nm，参考波长630nm)测定各孔吸光度(A)值计算细胞生长抑制率并计算IC50值以及相关系数(r)。……