况树斌 孟建明

陕西省南郑县圣水镇兽医站，陕西南郑723100

做好重大动物疫病的监测和预警是有效防止疫病发生的措施之一，动物血清学检测是动物疫病监测的重要手段，制备有效合格的血清是动物疫病监测的首要条件。笔者结合实际工作经验，就常见动物的采血方法及血清制备作了如下总结，供同仁参考。

1 常见动物采血方法

1.1 猪血的采集

采血部位为前腔静脉（仔猪）或耳静脉（成年猪）。

1）前腔静脉采血。该法适用于35～70kg的猪，可采用仰卧或站立保定。助手将猪保定好后，采血者先用75%的酒精对猪的前腔静脉窝（位于肩胛内侧，手压有窝状感）进行消毒，再手持采血器，以45～60°的倾斜度朝向心端刺入2～3cm；回抽采血器，在有血回流时，根据需要采3～5mL即可。

2）耳静脉采血。该法适用于较大的猪（如成年母猪或种公猪）或采血较少时，可采用侧卧或站立保定。助手保定好猪只后，采血者一只手拉直猪耳，另一只手先用75%酒精对耳静脉处进行消毒，再持采血器从远心端平行耳静脉刺入；采血完毕时先松开握耳根的手，然后拔出采血器，再用干棉球按压采血处约1min（直至采血部位不出血）。

1.2 牛、羊血的采集

采血部位通常为颈静脉。

1）牛的颈静脉采血。采用站立保定（最好在六柱栏中保定），采血者沿颈静脉沟（对于种牛或种羊应适当剪毛）消毒，用一只手按压颈静脉下端，使其充盈怒张；另一只手持16号针头，垂直刺入颈静脉处1～2cm，血液即可流到采血器中；终止采血后，先松手，后拔针头，并用酒精棉球按压采血部位约1min。

2）羊的颈静脉采血。采用骑式保定法保定，助手跨骑在羊背上，两手抓住羊角或羊耳；采血者对羊的颈静脉沟部位剪毛、消毒，一只手按压颈静脉下端，使其充盈怒张；另一只手将12号针头平行于颈静脉朝远心端刺入0.5～1.0cm，血液即可流到采血器中；采血完毕后，先松手，后拔针头，并用酒精棉球按压采血部位约1min。

1.3 鸡血的采集

采血部位为鸡翅静脉，保定方法为卧式保定。助手将鸡保定好后，采血者将鸡翅拉直呈30°倾斜，消毒翅静脉处，将采血器平行翅静脉朝远心端刺入；血液流出后，固定采血器，回抽活塞；采血完毕后，用干棉球压紧采血部位并拔出采血器，持续按压采血部位直至不出血。

2 血清的制备

2.1 自然析出法

将采集的血样呈30～45°斜放，静置2h，待血液完全凝固后可带回实验室；再将血样立放，夏季3～5h后即可得到血清，冬、春季节由于气温较低，血清析出较慢，可于第2天分离到血清。

2.2 离心机分离法

此法适用于采样任务大、时间紧的情况，将采集的血样呈30～45°斜放，静置，血样凝固后置于离心机中，以3 500～4 000r／min的速度离心5～8min，即可得到所需的血清。

以上2种方法均可分离出血清，自然析出法较离心机分离法获得的血清质量好，但较费时。

3 注意事项

3.1 采样要有随机性

采样要随机，不要挑着采，更不要专挑那些不健康、消瘦的牲畜。如果挑着采样，检测的结果不具有代表性，就失去了检测的意义。

3.2 选好采血时间

由于接种疫苗后，动物体内要产生稳定的抗体需要一定的时间和过程。因此，进行鸡新城疫疫苗、禽流感疫苗、猪瘟疫苗及牛羊口蹄疫疫苗抗体检测，在免疫后21d采血较合适；进行猪口蹄疫疫苗、高致性猪蓝耳病疫苗抗体检测，在免疫后28d采血较好。

3.3 做好标记

将血样进行编号并做好标记，分离血清的标记应与血样编号一致；同时，填写采样单，并一一对应。采样单是对采样品种群基本情况的简要记录，包括畜主信息、饲养量、采样量、采样时间、免疫时间、疫苗种类和生产厂家、接种剂量等，均要一一填写完整。

3.4 及时送检

血清分离好后，有条件的应于当日连同采样单一起送交上级实验室保存；没有条件的则自行冷冻保存，冷藏送检，避免因血清腐败变质而影响检测结果。