孙 艳，徐风华，王欢欢（解放军总医院药品保障中心，北京 100853）

蜂地麻涂剂的稳定性研究

孙 艳，徐风华，王欢欢（解放军总医院药品保障中心，北京 100853）

目的：考察蜂地麻涂剂的稳定性，为临床合理贮存、使用该药品提供参考。方法：采用多梯度HPLC法同时测定盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱的含量，按《中国药典》（2010年版）药物制剂稳定性试验指导原则进行影响因素试验和长期试验，考察蜂地麻涂剂在不同试验条件下的外观性状、pH以及主成分（盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱）含量变化。结果：影响因素试验结果显示，样品在60 ℃及高湿条件下含量有所下降；长期试验考察结果显示各项质量指标未见明显变化。结论：蜂地麻涂剂的稳定性较好，可将其有效期暂定为1年。

蜂地麻涂剂；稳定性；影响因素；长期试验

口腔溃疡是发生在口腔黏膜上的浅表性溃疡，具有周期性、复发性及自限性等特点，医学上称为“复发性口腔溃疡”。其发病因素较多，包括免疫学因素、遗传因素、内分泌因素、消化系统因素、环境因素、感染因素、微循环障碍及血液流变学异常等，目前认为是多种因素综合作用的结果[1]。临床上主要的治疗原则是消除病因、增强免疫力、对症治疗，以减少口腔溃疡的复发次数，延长间隙期，减轻疼痛，促进愈合[2-3]。蜂地麻涂剂为我院非标准制剂[总制字（2011）B01019]，其主药为盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱，临床用于口腔溃疡的局部治疗[4]，具有止痛、保护黏膜上皮的作用，治疗效果显著。本研究对蜂地麻涂剂进行影响因素试验及12个月的长期稳定性试验，以期为制定该产品的有效期提供参考。

1 仪器与试药

Agilent 1200 高效液相色谱仪（含G1322A型脱气机、G1314A型四元梯度泵、G1329B型自动进样器、G1316A型柱温箱、G1314B紫外检测器，美国安捷伦科技有限公司），AG135分析天平（美国梅特勒托利多公司），HI 9321 pH计（意大利哈纳仪器有限公司），隔水式培养箱（上海一恒科学仪器有限公司），SGSP-02电热恒温隔水式培养箱（湖北黄石恒丰医疗器械有限公司）。

盐酸丁卡因（中国食品药品检定研究院，批号100456-200301）；盐酸麻黄碱（中国食品药品检定研究院，批号171241-200506）；乙腈（Fisher公司，批号1002041）；硝酸钾（化学纯，批号20030626）；磷酸二氢钠（分析纯，批号970126）；三乙胺（分析纯，批号20081206）；磷酸（分析纯，批号20091106）。

蜂地麻涂剂（解放军总医院制剂室配制，规格：5 mL，批号20120726-1、20120726-2、20120726-3）。

2 方法与结果

2.1 性状与pH值

本品为淡黄色粘稠澄明液体。采用HI 9321 pH计测定，本品pH 3.0 ～ 4.5。

2.2 含量测定

采用多梯度HPLC法同时测定蜂地麻涂剂中盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱的含量[5-6]。

2.2.1 色谱条件采用Agilent十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以0.05 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（含0.2%三乙胺）-乙腈（90∶10，用磷酸调节pH值至4.0）为流动相A，0.05 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（含0.2%三乙胺）-乙腈（30∶70，用磷酸调节pH值至4.0）为流动相B，检测波长为218 nm，流速为1.0 mL·min-1，进样量20 μL。梯度洗脱程序详见表1。

表1 梯度洗脱程序Tab 1 Process of gradient elution

2.2.2 溶液的配制1）对照品溶液：取对照品盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱适量，分别精密称定，加水溶解，混匀制成1 mL约含0.25 mg的溶液，即得对照品溶液。2）供试品溶液：取本品适量，加水溶解制成每1 mL约含盐酸麻黄碱0.25 mg的溶液，摇匀，即得供试品溶液。3）阴性对照溶液：取蜂蜜适量，加水制成与样品同浓度的溶液作为阴性对照溶液。

2.2.3 方法学实验结果[7]在“2.2.1”项色谱条件下，盐酸麻黄碱对照品的保留时间约为5.7 min，盐酸丁卡因对照品的保留时间约为37.1 min，两者的分离度大于5.0，符合要求，空白辅料对含量测定没有干扰，见图1。理论塔板数按盐酸丁卡因峰计算为46 955，按盐酸麻黄碱峰计算为5545。盐酸丁卡因在50.26 ～753.90 μg·mL-1范围内线性关系良好（r = 1.000），平均回收率为100.25%，RSD为0.75%（n = 9）；盐酸麻黄碱在51.38 ～ 770.70 μg·mL-1范围内线性关系良好（r = 0.999 5），平均回收率为99.57%，RSD为0.91%（n = 9）。

2.3 影响因素试验

2.3.1 高温试验取供试品（批号20120726-3），置适宜的洁净容器中，60 ℃温度下放置10 d，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测。

图1 蜂地麻涂剂高效液相色谱图A – 阴性对照，B – 对照品，C – 供试品；1 – 盐酸麻黄碱，2 – 盐酸丁卡因Fig 1 HPLC chromatograms of pigmentum FengdimaA – negative control, B – reference, C – sample; 1 – ephedrine hydrochloride, 2 – tetracaine hydrochloride

2.3.2 高湿试验取供试品（批号20120726-3），置恒湿密闭容器中，在25 ℃、相对湿度（90±5）%条件下放置10 d，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测。

2.3.3 强光照射试验取供试品（批号20120726-3），放在装有日光灯的光照箱内，照度为（4500±500） lx，放置10 d，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测。详见表2。

表2 影响因素试验结果Tab 2 Results of the in fl uence factors test

表2结果显示，蜂地麻涂剂在高温、高湿、强光照射条件下，性状未见明显改变，pH值较稳定。盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱对光照比较稳定，含量没有明显变化；对湿度和温度较为敏感，在高温和高湿条件下的含量有所下降。

2.4 长期试验

按《中国药典》附录药物稳定性试验指导原则长期试验的要求及相关文献[8-9]进行稳定性试验，取供试品（批号20120726-1、20120726-2、20120726-3）3批，市售包装，置隔水式培养箱中，在温度（25±2）℃、相对湿度（60±10）%的条件下放置12个月。分别于0、3、6、9、12个月取样，按稳定性重点考察项目进行检测。详见表3。

表3 长期稳定性试验结果Tab 3 Results of the long-term stability test

表3结果显示，蜂地麻涂剂在温度（25±2）℃、相对湿度（60±10）%的条件下放置0、3、6、9、12个月，性状未见明显改变，pH值比较稳定。室温放置12个月盐酸丁卡因含量基本不变，盐酸麻黄碱含量有所下降但仍在合格范围内。

3 讨论

蜂地麻涂剂源于我院医院制剂蜂地麻滴眼液，在临床实践中发现蜂地麻滴眼液对口腔溃疡具有良好的治疗作用，其研究结果表明本制剂稳定性较好。由于处方中蜂蜜的成分复杂，制成蜂地麻涂剂后，不同的制备工艺和包装条件有可能对制剂质量产生影响，因此有必要对本品进行稳定性评价。根据稳定性考察结果，蜂地麻涂剂稳定性较好，可将有效期暂定为1年，贮藏条件为密闭、在阴凉处保存。

[1]叶国增，沈映冰.复发性口腔溃疡治疗的中西医结合治疗临床观察[J].中国现代药物应用，2012，6（20）：46-47.

[2]钱雅琴.泛酸和B族维生素对口腔溃疡治疗的临床疗效观察[J].中国医药指南，2014，12（7）：155-156.

[3]王雪梅，薄磊，祁晶，等.黄芪多糖对大鼠口腔溃疡治疗作用研究[J].天然产物研究与开发，2013，25（3）：321-324.

[4]孙艳，周晓兵，谢牧牧.蜂地麻滴眼液的制备及质量控制[J].中国现代医学杂志，2008，18（11）：1514-1516，1520.

[5]王斌，李昌亮，谢朵朵.高效液相色谱法同时测定盐酸丁卡因麻黄碱溶液2种组分的含量[J].中南药学，2013，11（8）：605-608.

[6]郑芳，朱雪松，李鹏，等.多步梯度高效液相色谱法测定口腔溃疡涂剂中3组分的含量[J].安徽医药，2010，14（10）：1153-1155.

[7]孙艳，周晓兵，谢牧牧.反相高效液相色谱法测定蜂地麻滴眼液的含量[J].药学实践杂志，2008，26（4）：294-296.

[8]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录199.

[9]朱兴年，王震，景荣芳，等.复方替硝唑栓剂的稳定性研究[J].中国药业，2007，16（21）：27-28.

The stability study on pigmentum Fengdima

SUN Yan, XU Feng-hua, WANG Huan-huan(Department of Pharmaceutical Care, PLA General Hospital, Beijing 100853, China)

Objective:To investigate the stability of pigmentum Fengdima and provide reference for its storage and utilization.Methods:A multiple gradient HPLC method was used to simultaneously determine the content of tetracaine hydrochloride and ephedrine hydrochloride. The appearance, pH and contents of tetracaine hydrochloride and ephedrine hydrochloride were investigated by in fl uence factors test and long-term test, according to the guidance for stability test of preparation stated in Chinese Pharmacopeia (2010 edition).Results:The results of in fl uence factors test showed that the contents of tetracaine hydrochloride and ephedrine hydrochloride decreased under 60 ℃ and high humidity conditions. Long-term test results showed that no obvious change was observed in quality indexes.Conclusion:Pigmentum Fengdima was a relatively stable preparation, and its shelf-life was tentatively set up as one year.

Pigmentum Fengdima; Stability; In fl uence factor; Long-term test

R917

A

1672 – 8157(2014)04 – 0209 – 03

2014-02-20

2014-05-08）

北京市中西医结合学会课题（FB724）

孙艳，女，副主任药师，主要从事医院药学工作。E-mail：301sunyan@sina.cn