景晓敏

探讨常规微生物学检验方法中影响念珠菌检验结果准确性的因素

景晓敏

目的 探讨在念珠菌的常规生物学检验中影响其检验结果准确性的相关因素。方法 采用常规方法分离培养鉴定 16 株念珠菌 , 对其中 8 株进行 DNA 序列分析以确定其分子型别。结果 为达到准确鉴定结果 , ATB 仪器鉴定时应将板条防御 28 e 进行 24 h 孵育。结论 培养基、培养温度以及稳定的时间控制是保证念珠菌检验结果准确性的最主要因素。

微生物检验；念珠菌；准确性；影响因素

随着抗生素以及各种激素和免疫抑制剂的过度使用 , 我国居民真菌感染呈现上升趋势。念珠菌感染是其中最为重要的一种 , 可表现明显的细菌感染症状 , 在早产、烧伤和器官移植及白血病等患者标本中都可检测到念珠菌［1］。由于相关规范的缺失和技术的落后 , 我国医疗单位仍采用显色平板分离对念珠菌进行鉴定 , 受到多种因素的影响［2］。本文对念珠菌检验中准确性的影响因素进行探讨 , 报告如下。

1 材料与方法

1. 1 材料 本文所用 16 株念珠菌来自于患者阴道分泌物、痰液、尿液和粪样等标本 , 还包括 3 株标准菌株。所用材料主要包括科玛嘉显色平板、培养基、ATB鉴定仪、DADE鉴定仪以及快速酵母菌鉴定板等。

1. 2 方法及观察指标 根据产品要求以及相关标准配置念珠菌培养基。于稳定时间和最适温度对所选念珠菌进行 2 d的培养基培养 , 并对其生长状况进行观察和记录。其次 , 采用ATB 系统对所用念珠菌进行鉴定 , 观察其于培养基中 1～3 d 的生长情况 , 于 ATB 仪器上判读其鉴定结果。

2 结果

16 株念珠菌进行分离培养后结果显示 , 培养 48 h 的念珠菌生长态势显著优于培养 24 h 的 , 且 35 e 的念珠菌生长情况优于 28 e 的念珠菌。使用不同质量和型号培养基进行培养的念珠菌显色结果也不尽相同。对念珠菌采用 ATB系统鉴定后结果显示 , 念珠菌的显色效果与培养基指示剂、培养时间和培养温度等因素密切相关。为保证菌种鉴定的稳定性应保证培养时间、温度和培养基的相同。与 ATB 系统鉴定结果相比 , 快速酵母菌鉴定板鉴定结果与其大致相同。该 16株念珠菌进行分子分型后结果显示 , 仅 1 株不适合自动化仪器鉴定。

3 讨论

念珠菌作为一种常见真菌 , 是人体正常菌群的一种 , 在人体中主要存在于皮肤、阴道、肠道和口腔等 , 可与外界环境相通腔道。当人体正常菌群发生紊乱 , 抵抗力和免疫力下降时 , 念珠菌可于定植部位大量增殖 , 入侵人体腔道 , 引发念珠菌感染。常见的念珠菌感染主要包括肺部炎症、眼部感染、传染性口角炎以及外阴阴道炎和真菌血症等［3］。

临床上对念珠菌感染进行诊断时主要依靠实验室微生物学技术分离鉴定患者标本中的念珠菌。显色培养基分离鉴定和沙保弱培养基分离培养是最为常规的念珠菌鉴定方法。但是在我国对于念珠菌的临床检验尚无标准检测手段和规范 ,其分离培养和鉴定等环节存在多种不可控因素 , 导致检测结果的准确性受到影响［4］。

为探讨在常规微生物学检验方法中影响念珠菌检验结果准确性的因素 , 在本文中选取从患者标本中分离的念珠菌 16株进行分离培养和鉴定 , 发现较高的孵育温度和较长的培养时间是念珠菌更好生长态势的最主要因素。大多数菌株通过科玛嘉显色培养基进行培养鉴定时 , 可于 24 h 左右显色。虽然白色念珠菌可通过绿色菌落判断 , 但一些念珠菌可由多种指示颜色 , 因而需要结合细胞形态和菌落特征进行判断 , 一些不显色的菌落需根据镜检结果进行鉴定。本文中发现快速酵母菌检验可在较短时间内满足检验需要 , 其结果与需 24 h的 ATB 鉴定系统相似。

综上所述 , 在念珠菌的鉴定中 , 培养时间、培养温度以及培养基和指示剂的选用都可影响念珠菌于培养基中的显色效果 , 从而影响检验结果的准确性。在念珠菌感染发生率的不断增高和相关标准欠缺的态势下 , 加强对念珠菌检验技术的研究仍是一个重要的课题。

［1］卢丽 , 齐亚娟 . 探讨常规微生物学检验方法中影响念珠菌检验结果准确性的因素 .中国保健营养 , 2013,02(下 ):997-998.

［2］刘学杰 , 娄峥 , 陈悦 . 影响念珠茵检验结果因素的探讨 .检验医学 , 2009,24(1):17-20.

［3］马岚云 , 代世娥 , 何鑫 , 等 .影响微生物检验结果的因素 .中国社区医师 , 2011(21):227.

［4］杨柳 , 郭清莲 , 申及 , 等 . 回顾性分析比较不同临床标本微生物检验的阳性率 .国际检验医学杂志 , 2011, 32(14):1573-1574.

2014-05-28］

466001 河南省周口市疾病预防控制中心