蒋海萍，廖丹葵，孙建华，童张法

抗氧化肽HDHPVC和HEKVC的反应动力学及抗氧化能力评价方法

蒋海萍，廖丹葵*，孙建华，童张法

（广西大学化学化工学院，广西 南宁 530004）

研究抗氧化肽His-Asp-His-Pro-Val-Cys（HDHPVC）、His-Glu-Lys-Val-Cys（HEKVC）和谷胱甘肽（glutathione，GSH）清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基的反应动力学特性。3 种抗氧化肽的二级反应动力学常数k2、抗氧化还原能力（antiradical power，ARP）及化学计量数等结果表明，其清除DPPH自由基能力的排列顺序为HEKVC＜HDHPVC＜GSH。通过比较3 种抗氧化肽在稳定状态及固定30 min反应时间条件下清除DPPH自由基能力检测方法的差异，发现3 种抗氧化肽均属于慢反应动力学行为，固定30 min反应时间所测得的半数有效浓度（median effective concentration，EC50）比稳态条件下测得值偏大3～5 倍。该研究表明HDHPVC和HEKVC是一种优良的天然抗氧化肽。

His-Asp-His-Pro-Val-Cys；His-Glu-Lys-Val-Cys；DPPH自由基；抗氧化；动力学

抗氧化肽是介于蛋白质和氨基酸之间的肽类，可从动植物等蛋白中提取，具有有效的抑制或减缓自由基及其所产生的氧化连锁反应的活性功能。一般用于评价体外抗氧化能力的方法主要分为抑制脂质过氧化法（硫氰酸铁法、过氧化值法和共轭二烯法等）、清除自由基法（2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis（3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid）ammonium salt，ABTS）法、氧化自由基吸收能力（oxygen radical absorption capacity，ORAC）法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）法、O2-·法和·OH法等）及金属离子螯合能力法3 类[1]。其中，DPPH分子结构中含有未成对电子，可以接受由抗氧化物质提供的H原子，其分子结构变为DPPH-H而导致反应体系颜色变浅或变为黄色，吸收值随之减弱或消失，可以定量反映出物质清除DPPH自由基能力[2-3]。因此，DPPH法常被用于检测固定反应时间条件下的DPPH自由基剩余百分比含量，间接反映物质的抗氧化能力[4-5]。……