张 新，张红城，董 捷，张根生*

蜂王浆主蛋白1低聚体的分离纯化及其圆二色谱分析

张 新1,2，张红城2，董 捷2，张根生1,*

（1.哈尔滨商业大学食品学院，黑龙江 哈尔滨 150076；2.中国农业科学院蜜蜂研究所，农业部农产品加工中心蜂产品加工分中心，北京 100093）

蜂王浆主蛋白1（major royal jelly protein 1，MRJP1）是蜂王浆主蛋白家族中最重要的成员之一，MRJP1存在单体和低聚体两种形式。为了研究MRJP1低聚体的二级结构信息，首先利用ToyoScreen GigaCap Q-650M离子交换柱从新鲜蜂王浆中纯化出MRJP1低聚体，经分析超速离心和高效液相色谱-串联质谱技术鉴定其为MRJP1低聚体后，再通过圆二色谱技术检测MRJP1低聚体在不同浓度Ca2+条件下（10、50、200 mmol/L）二级结构的变化情况，并测定其变性温度。结果表明：该分离方法可以一步纯化出MRJP1低聚体，MRJP1低聚体的二级结构中β-折叠占比最高（55%左右），其次是无规卷曲（20%左右）和α-螺旋（15%左右），β-转角（10%左右）含量最低；MRJP1低聚体的变性温度为55 ℃。实验提出了MRJP1低聚体新的纯化方法及其二级结构的基本信息。

蜂王浆；MRJP1；纯化；圆二色谱

蜂王浆（royal jelly，RJ）是5～15 日龄工蜂舌腺和上颚腺所分泌的乳白色或淡黄色乳状液体，主要用于饲喂蜂王及3 日龄内的蜜蜂幼虫，是蜂王幼虫整个发育期和雄蜂幼虫前期的唯一食物[1-2]。蜂王浆具有多种生物功能，如抗氧化[3]、抗肿瘤[4-5]、抗菌[6]、降血压[7]、降血脂[8]以及对糖尿病有一定 的治疗作用[9]等。

新鲜蜂王浆中蛋白质含量丰富，占蜂王浆总量的12%～15%。蜂王浆中的蛋白质包括水溶性蛋白和水不溶性蛋白，其中水溶性蛋白占蜂王浆蛋白的46%～89%，为蜂王浆蛋白的主要组成，故称为蜂王浆主蛋白（major royal jelly proteins，MRJPs）家族[10-12]。……