■ 赵 巍 付 丽 王 欣 王兰惠 梁海威 甄玉国，2

（1.吉林农业大学吉农博瑞奶牛研发中心，吉林长春130118；2.长春博瑞饲料集团有限公司技术中心，吉林长春130114）

乳酸菌(Lactic Acid Bacteria,LAB)是人体的益生菌,具有调节人体胃肠道正常菌群、保持微生态平衡,提高食物消化率和生物价,降低血清胆固醇,抑制肠道内腐败菌的生长繁殖和腐败产物的产生等作用[1-3]，在医药、食品等工业有广泛的应用[4]。植物乳杆菌是一类化能厌氧型乳酸菌[5],不同的发酵工艺对其生长有不同的影响。对于一个工业生产菌株，为了充分发挥菌种的生产能力实现高产，不仅需要拥有一个良好的发酵培养基，还需要对发酵条件进行优化。本试验对植物乳杆菌的培养方式、发酵温度、培养基初始pH值、接种量进行了研究，旨在获得植物乳杆菌的最佳发酵条件，提高菌体生物量。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种来源

植物乳杆菌：由中国微生物菌种保藏中心提供。

1.1.2 培养基

种子培养基[6]：蛋白胨10.0 g、牛肉膏10.0 g、酵母粉5.0 g、葡萄糖5.0 g、吐温80 1.0 ml、柠檬酸氢二铵2.0 g、无水乙酸钠 5.0 g、K2HPO42.0 g、MnSO4·H2O 0.05 g、MgSO4·7H2O 0.2 g、蒸馏水 1.0 L，pH值6.80，121℃高温灭菌20 min。

发酵培养基：蛋白胨30.0 g、葡萄糖30.0 g、无水乙酸钠 15.0 g、柠檬酸氢二铵 5.0 g、吐温 80 4.0 ml、K2HPO42.0 g、MgSO4·7H2O 0.2 g、MnSO4·H2O 0.05 g、蒸馏水1.0 L,pH值6.80，121℃高温灭菌20 min。

1.2 方法

1.2.1 试验设计

采用单因素试验设计，筛选植物乳杆菌生长的培养方式、最佳初始pH值、最适培养温度和最适接种量，然后进行正交试验。

1.2.2 乳酸菌生长曲线绘制

取斜面菌种一环，接入MRS液体培养基中，37℃培养24 h，活化两代。将活化后的乳酸菌，接入400 ml MRS液体培养基中，接种量为2%。将接入菌体的液体培养基摇匀后分装于10 ml EP管中，每管5 ml，置于37℃的培养箱中静置培养。……