沈玉琴 许联红 高志洪

类风湿关节炎(RA)是一种以慢性破坏性关节病变为特征的全身性自身免疫病。具有高发性、高致残性等特点, 早期诊断和治疗是减少和阻止病情发展及防止致残的关键。RA的发病机制仍未明确, 近年的研究表明瓜氨酸化现象可能与RA的发病相关［1,2］。在1987年美国风湿病协会(ARA)RA的诊断标准中, 检测血清IgM类RF是唯一的实验室指标,但RF在疾病早期常呈阴性, 不能预测早期患者。为实现对RA的早期诊断, 2009年美国风湿病学学会和欧洲抗风湿病联盟(ACR/EULAR)共同提出了新的RA分类标准, 将抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies, anti-CCP)和RF共同作为RA的血清学评分标准［3］。本文通过全自动电化学发光法检测抗CCP抗体, 并评价其对RA的诊断效能和临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 RA组：选取江苏大学附属武进医院2011年11～2013年6月风湿免疫科住院类风湿关节炎患者144例,男 /女 ：32/112, 年龄 (24～87)岁 , 平均为 (56.3±13.5)岁 , 均符合2009年美国风湿病学学会和欧洲抗风湿病联盟(ACR/EULAR)修订的RA分类标准。非RA的其他风湿病组(非RA组)：为本院同期风湿免疫科住院患者81例, 男/女：17/64, 年龄(22～83)岁, 平均为(55.6±15)岁。包括骨关节炎(OA)34例, 系统性红斑狼疮(SLE)11例, 干燥综合征(SS)12例,强直性脊柱炎(AS)15例, 反应性关节炎(ReA)9例。RA组和非RA组间年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 研究方法 采用电化学发光仪(Cobas E601, 德国)测定抗CCP抗体, <7 U/ml的结果记为7 U/ml, >500 U/ml的记为500 U/ml, 抗CCP抗体>17 U/ml定为阳性临界值。特定蛋白分析仪(BNP,德国)免疫透射比浊法测定RF, RF<9.56 IU/ml的记为9.56 IU/ml, 以RF>15 IU/ml定为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0进行统计分析, 抗CCP抗体、RF血清水平测定结果用(±s)表示, 浓度比较采用秩和检验, 计数资料采用配对卡方检验。使用MedCalc软件进行ROC曲线分析比较。P<0.05为差异有统计学意义。抗CCP抗体与ESR、CRP及RF的相关性采用SPSS17.0的相关性分析。

2 结果

2.1 两组间血清抗CCP 抗体和RF血清水平 RA组血清抗CCP抗体水平和阳性检出率明显高于非RA组(P<0.001)；两组间RF水平和阳性率差异有统计学意义(P<0.001), 见表1。

2.2 血清抗CCP抗体和RF的ROC曲线分析 依据是否诊断为RA作为状态变量, 血清RF和抗CCP抗体检测结果绘制ROC曲线, 见图1。抗CCP抗体的AUC与RF差异无统计学意义(P>0.05)。抗CCP抗体检测敏感性为94.4%高于RF的89.6%, 但无统计学意义；抗CCP抗体检测特异性为97.5%明显高于RF的88.9%(P<0.05), 见表2。

图1 抗CCP 抗体和RF 的ROC 曲线比较

表1 两组间血清抗CCP 抗体和RF血清水平比较( ±s)

表1 两组间血清抗CCP 抗体和RF血清水平比较( ±s)

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表2 血清抗CCP抗体和RF浓度检测的AUC、敏感度和特异度比较

2.3 抗CCP抗体浓度与ESR和CRP的相关性 抗CCP抗体浓度和RF浓度, 及与RA活动度相关的血清学指标ESR和CRP水平均无相关性(P>0.05), 见表3。

表3 抗CCP 抗体浓度与ESR、CRP及RF的相关性

3 讨论

RF是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体, 主要存在于RA患者的血清和关节液中, 是最早应用于RF诊断的检测指标, 但在其他结缔组织疾病、慢性感染性疾病、肿瘤及正常老年人群也可出现RF升高, 甚至正常人中也有一定的阳性率, 故特异性较差。抗CCP抗体是环状聚丝蛋白的多肽片段, 以IgG型为主。2000年Schellekens等［4］首先报道了用ELISA法检测抗瓜氨酸抗体, 该方法采用针对环状瓜氨酸而非自然条件下的线状瓜氨酸为抗原 故将检测出的抗体称之为抗环瓜氨酸抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies,抗CCP抗体), 近年来抗CCP抗体才被广泛应用［5］。

本研究发现RF在RA组中阳性率为88.9%, 非RA组中阳性率为11.1%, 在系统性红斑狼疮、干燥综合症、反应性关节炎及骨关节炎中均存在RF阳性。抗CCP抗体在RA组和非RA组中的阳性率分别为93.1%和2.5%, 仅系统性红斑狼疮中存在2例阳性。

ROC曲线分析结果显示, 抗CCP抗体的AUC为0.956与RF(0.930)差异无统计学意义(P>0.05)。当抗CCP抗体以11.34 U/ml,RF以>13.8 IU/ml为最佳cut-off 值时, 抗CCP抗体检测敏感性为94.4%高于RF的89.6%, 但无统计学意义；抗CCP抗体检测特异性为97.5%明显高于RF的88.9%(P<0.05)。抗CCP抗体的高特异性对于RF阴性的RA患者有非常高的诊断价值。另外, 本文未发现抗CCP抗体与RF血清水平存在相关性。分析抗CCP抗体与RA活动度相关的血清学指标ESR和CRP水平均无明显相关性, 与Munevver S等报道的结果相一致。

本实验室采用的电化学发光法检测抗CCP抗体具有较高的敏感性和特异性, 结果稳定可靠, 自动化程度高, 可用于临床常规检测, 可提高RA早期诊断的准确性。

［1］Klareskog L, Widhe M, Hermansson M, et al.Antibodies to citrullinated proteins in arthritis: pathology and promise.Curr Opin Rheumatol, 2008(20): 300-305.

［2］Suzuki A, Yamada R, Yamamoto K.Citrullination by peptidylarginine deiminase in rheumatoid arthritis.Ann N Y Acad Sci, 2007(1108):323-339.

［3］Polido PJ, Vieira SE, Fonseca JE.Rheumatoid arthritis: what is refractory disease and how to manage it .Autoimmun Rev, 2011,10(11): 707-713.

［4］Schellekens GA, Visser H, de Jong BA, et al.The diagnostic properties of rheumatoid arthritis recognizing a cyclic citrullinated peptide.Arthritis Rheum, 2000(43): 155-163.

［5］Cho SY, Kang SY, Lee HJ, et al.A comparative evaluation of the diagnostic value of anti- cyclic citrullinated peptide and rheumatoid factor in rheumatoid arthritis.Korean J Lab Med, 2008, 28 (1): 39-45.