龚艳容 陈 娜 张幸国

(浙江大学医学院附属第一医院,浙江 杭州 310003)

近年来的研究发现在非酒精性脂肪肝和丙型肝炎患者血清中,M30 含量显著升高,且M30 能比转氨酶更为敏感地表征这两种疾病[1],然而在慢性丙型肝炎患者中,丙型肝炎病毒感染引起的肝纤维化、脂肪化等并发症是否与M30 水平有关却研究甚少,本文的目的是研究丙型肝炎患者血清M30 水平与丙型肝炎并发症的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取200例本院2012年1月～2013年1月未经治疗的丙型肝炎(CHC)患者,其中男125例,女75例,年龄25～68岁,平均(36.8±12.5)岁;选取健康对照者100例。按是否感染丙型肝炎分为2组：丙型肝炎组200例;健康对照组100例。肝活检标本与血清均来源于浙江大学医学院附属第一医院。

1.2 试剂与仪器 M30-Apoptosense ELISA 试剂盒(Peviva AB,瑞典)。

1.3 实验方法 慢性丙型肝炎定义为在患者血清中检测到HCV RNA 为确诊标准[1];血清M30 水平检测按照M30-Apoptosense ELISA 试剂盒说明书步骤操作,在450nm 处读取吸光值,计算血清中M30的水平：丙型肝炎患者肝组织活检由专业的病理科医生进行METAVIR 纤维化分级[2](F0-F4)。肝组织炎症评分采取HAI 系统[3](轻微0～5分,中度6～10分,重度11～16分),肝脂肪化分级根据含脂肪小滴的肝细胞百分比决定(0 为＜3%,1 为3%～30%,2 为31%～59%;3 为＞59%);测定选取的丙型肝炎患者血清M30 水平,同时对该丙型肝炎患者的肝组织进行病理评估,评估其脂肪化程度、纤维化程度及炎症评分。

2 结果

2.1 丙型肝炎患者血清M30 水平与肝活检结果丙型肝炎组M30 水平(298±70.8)U/L,显著高于健康对照组(135±33.8)U/L(P＜0.01),且丙型肝炎患者组肝组织活检发现不同程度的脂肪变性,纤维化和炎症反应,详见表1。

2.2 丙型肝炎患者血清M30 水平与肝脂肪化程度、肝纤维化程度和肝炎症状况的关系 检测丙型肝炎患者血清M30 水平和对应的肝脂肪化程度,结果随着肝脂肪化程度的加深,相应的M30 水平也上升,0 级为(226±46.9)U/L,1 级为(279±80.4)U/L,2 级为(368±31.2)U/L,3 级为(387±20.4)U/L,0级、1 级与2 级、3 级相比,M30 水平比较差异有统计学意义,2～3 级为(377±25.1)U/L,0～1 级为(249±61.4)U/L(P＜0.05),详见表2。同样,随着肝纤维化程度的加深,相应的M30 水平也上升,F0 为(235±26.1)U/L,F1 为(252±60.3)U/L,F2 为(348±50.9)U/L,F3 为(385±31.2)U/L,F4 为(368±40.1)U/L,丙型肝炎患者M30 水平和肝纤维化有关,F2-F4(364±38.7)U/L 显著高于F0-F1(243±46.8)U/L(P＜0.05),详见表3。然而,丙型肝炎患者M30 水平和相应的肝组织HAI 评分无关,轻微炎症为(277±66.9)U/L,中度炎症为(311±42.3)U/L,重度炎症为(303±70.1)U/L,这说明丙型肝炎患者M30 水平与肝组织炎症程度无关(P＞0.05),详见表4。

表2 丙型肝炎患者肝脂肪化与血清M30 水平比较(±s)

表2 丙型肝炎患者肝脂肪化与血清M30 水平比较(±s)

表3 丙型肝炎患者肝纤维化与血清M30 水平比较(±s)

表3 丙型肝炎患者肝纤维化与血清M30 水平比较(±s)

表4 丙型肝炎患者肝炎症评分与血清M30 水平比较(±s)

表4 丙型肝炎患者肝炎症评分与血清M30 水平比较(±s)

3 讨论

本文的研究发现了丙型肝炎患者,血清M30 水平显著高于健康人群,并且当丙型肝炎患者肝纤维化和脂肪化程度因为HCV 感染影响出现并加深的时候,血清中M30 水平会显著上升,但M30 水平和丙型肝炎患者肝组织炎性变化无关,这可能是因为丙型肝炎病毒除了能诱导肝细胞凋亡之外,还可引起肝细胞坏死性炎症,而肝细胞的坏死不能引起caspase 的激活,因此M30 水平不上升,然而遗憾的是,至今血清学检测肝细胞坏死性炎症的检测手段仍然十分有限[4]。有文献报道,凋亡和HCV 感染引起的肝脂肪变性有关[5],当用M30 水平来表示肝细胞的凋亡时,M30 水平随着肝脂肪化程度的加深而升高,这与本文的研究结果相一致。这些研究证实了检测丙型肝炎患者血清M30 水平对监测丙型肝炎患者肝纤维化程度和脂肪化程度有十分重要的价值,减轻了肝组织活检对患者带来的风险和痛苦。

已经有很多文献证实对于非酒精性肝脂肪化疾病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD),肝细胞凋亡在脂肪性肝炎的疾病进展和肝损伤中发挥重要作用,M30 水平已经被报道可以用来鉴别单纯性脂肪肝和脂肪性肝炎[6],并用来判断非酒精脂肪性肝炎的肝纤维化程度[7],因此肝细胞凋亡的特异性标志物M30 十分有希望成为监测该类疾病的重要指标。本文结果显示血清M30 水平可以判断丙型肝炎患者的肝纤维化、脂肪化程度,对比肝组织活检,检测肝病患者血清M30 更加快速和安全,这对减轻诸如丙型肝炎,非酒精脂肪性肝炎等多种肝病患者的痛苦具有十分重大的意义。

[1]中华医学会肝病学分会,中华医学会传染病与寄生虫病学分会.丙型肝炎防治指南.中华传染病杂志,2004,22(2)：121

[2]Theise N D,Bordenheimer H C,Ferrel L D.2007 Acute and chronic viral hepatitis.Mac Sweens Pathology of the liver,2007,8(5)：418

[3]Knodell R G,lshak K G,Black W C.et al,Formulation and application of a numerical scoring system for assessing histological activity in asymptomatic chronic active hepatitis.Hepatology,1981,1(5)：431

[4]Cheong J Y,Kim Cho S W,et al.Serum markers for necroinflammatory activity in patientswith chronic viral hepatitis and normal or mildly elevated aminotransferase levels.Liver Int,2011,31(9)：1352

[5] Papatheodoridis G V,Hadziyannis E,Tsochatzis E,et al.Serum apoptotic caspase activity in chronic hepatitis C and nonalcoholic fatty liver disease.J Clin Gastroenterol,2010,44(4)：87

[6]董秋艳,韩涛,郭震,等.非酒精性脂肪肝患者血清CK-18 M30水平的测定.天津医科大学学报,2011,17(4)：486

[7]Ounossi Z M,Jarrar M,Nugent C,et al.A noveldiagnostic biomarker panel for obesity-related nonaloholic,steatohepatitis(NASH).Obes Surg,2008,18(11)：1430