三七总皂苷对肺纤维化小鼠细胞凋亡及Bax/Bcl-2表达的影响*
2013-09-21孙晓芳牛建昭党志勇杨慧慈
孙晓芳,段 斐△,牛建昭,党志勇,杨慧慈
(1.河北大学基础医学院组胚教研室 071000;2.北京中医药大学基础医学院组胚教研室 100029;3.河北大学基础医学院办公室 071000;4.河北省保定市第二医院儿科 071000)
肺纤维化是以上皮细胞损伤、基膜脱落、成纤维细胞增殖、间质炎症、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)过度沉积为主要特点的肺部疾病,近年来大量研究显示成纤维细胞增殖与纤维化形成可以独立于炎症而发生,因此提示肺纤维化肯定存在细胞凋亡与增殖的失衡[1]。在细胞凋亡发生过程中受许多因子的参与调控,其中Bax/Bcl-2是细胞凋亡的重要调控因子,他们的表达与肺纤维化肺组织细胞凋亡的发生、发展密切相关[2-3]。
前期研究表明,PNS可降低肺纤维化小鼠血清中Ⅲ-C、Ⅳ-C型胶原、层粘连蛋白(laminin,LN)及透明质酸(hyaluronan,HA)的含量,降低肺纤维化小鼠肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)的含量,减轻肺组织胶原的增生,对BLM诱导的肺纤维化起到一定的防治作用[4-5]。本研究在上述实验的基础上,观察三七总皂苷(PNS)对肺纤维化小鼠肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2表达的影响,进一步探讨其防治肺纤维化的作用及机制。
1 材料与方法
1.1 材料 选取健康清洁级C57BL/6雄性小鼠90只,体质量为(20±2)g,购自北京维通利华公司[动物合格证号:SCXK(京)2006-0009]。
1.2 试剂与仪器 PNS,四川金郁金科技有限公司(批号:050302);注射用盐酸博莱霉素(BLM),浙江海正药业股份有限公司(批号:H20055883);原位细胞凋亡检测试剂盒,罗氏公司(批号:mk1020);免疫组化Bax抗体,Santa Cruz公司(批号:sc-526);免疫组化 Bcl-2抗体,Santa Cruz公司(批号:sc-492);免疫组化超敏兔二抗及DAB显色试剂盒,北京中杉金桥生物技术有限公司;……
