李莎莎，侯艳宁

(1.承德医学院生理学教研室，河北承德 067000;2.白求恩国际和平医院药剂科)

神经甾体指在中枢神经系统合成的或经血脑屏障进入神经系统发挥作用的甾体及其代谢衍生物。孕烯醇酮(PREG)是胆固醇合成神经甾体过程中最初的产物，具有神经调节和神经保护作用[1-2]。本研究通过制备东莨菪碱致学习记忆损伤大鼠模型，检测模型动物相关脑区PREG的变化，初步探讨学习记忆损伤的可能机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 成年雄性SD大鼠16只，购自河北省实验动物中心(合格证号909044)，体重200-220g。大鼠随机分为模型组及生理盐水对照组，每组8只。第1-5d定位航行实验前30min，模型组大鼠腹腔注射东莨菪碱(2.0mg/kg)制作学习记忆损伤模型，对照组注射等量生理盐水。

1.2 主要试剂及仪器 PREG，美国Sigma公司;氢溴酸东莨菪碱注射液，上海禾丰制药有限公司。HP-1100高效液相色谱－质谱系统，美国安捷伦公司;高效液相色谱系统，日本岛津公司;Oasis HLB 1cc固相萃取柱，美国Waters公司(30mg)。

1.3 实验方法

1.3.1 Morris水迷宫行为学测试:①第1-5d进行定位航行实验:将大鼠从固定入水点面向池壁放入水中，记录大鼠寻找并爬上平台的时间，即逃避潜伏期。②定位航行实验结束后间隔1d撤去平台，于第7d进行空间探索实验:将大鼠从原固定入水点面向池壁放入水中，记录大鼠第一次到达原平台所在位置的时间以及在180s内跨越原平台所在位置的次数。

1.3.2 样品采集、PREG提取及测定:空间探索实验结束后大鼠断头处死，迅速剥开颅骨在4℃生理盐水中分离额叶皮质及海马，称重后-70℃保存。……