李 强，颜 勇，苏哲君，陈志宏

(1.承德医学院，河北承德 067000;2.承德医学院附属医院口腔科)

海马与认知功能密切相关，可直接干预信息贮存和回忆，且是缺血损伤最敏感的脑区[1]。研究发现[2]，糖尿病时存在认知功能障碍，表现为学习、记忆和解决问题的能力下降。丝胶是蚕茧中的水溶性蛋白质，约占茧丝的30%左右，民间有蚕茧泡水降血糖的验方。本课题组的前期研究发现，丝胶可明显降低血糖和保护糖尿病时胰岛细胞损伤[3-4]。本研究拟通过观察2型糖尿病模型大鼠海马神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)表达的变化，探讨丝胶保护糖尿病海马损伤的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物分组 48只清洁级雄性SD大鼠，购自河北医科大学实验动物学部，合格证号:712024。48只SD大鼠随机分组:正常对照组(n=12)，大鼠常规饲养，自由摄食、饮水;糖尿病模型组(n=12)，建立2型糖尿病动物模型后，不再做任何处理;丝胶治疗组(n=12)，建立2型糖尿病动物模型后，给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35d;二甲双胍组(n=12)，建立2型糖尿病动物模型后，给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃35d。

1.2 糖尿病动物模型的建立 链脲佐菌素，临用时用pH4.4的枸橼酸钠-枸橼酸缓冲液配成2%的溶液，按剂量25mg/kg连续腹腔注射(3d)，7d后以空腹血糖≥16.7mmol/L作为成模标准。

1.3 实验药物与试剂 链脲佐菌素，美国Sigma公司;丝胶，彩色蚕茧经浸泡、水煎、过滤、浓缩而成，蚕茧由承德医学院蚕业研究所提供;盐酸二甲双胍，辽宁一成药业有限公司;血糖检测试剂盒，保定长城临床试剂有限公司;兔抗nNOS抗体，美国Santa Cruz公司。

1.4 指标检测

1.4.1 血糖:各组大鼠禁食12h后4%水合氯醛腹腔注射麻醉，经内眦于眶后静脉丛采血，3000r/min离心20min，取血清采用葡萄糖氧化酶法检测血糖。……