乳化异氟醚后处理对缺血/再灌注大鼠离体心脏超微结构的影响*
2013-09-21杜文娟王海英
陈 伟,杜文娟,徐 鹏,王海英,喻 田
(遵义医学院麻醉系,贵州 遵义 563099)
EI是我国自主研发的一类新型的静脉麻醉药,大量的动物实验研究[1-3]证明了其有效性和安全性。缺血后处理、EI后处理对缺氧/复氧成年大鼠心肌细胞细胞超微结构具有保护作用[1]。那么,缺血后处理、EI后处理对缺血/再灌注成年大鼠离体心脏超微结构是否也具有保护作用呢?本研究旨在观察EI后处理对缺血再灌注成年大鼠离体心脏的超微结构和线粒体评分的影响,并通过N-2-巯基丙酰甘氨酸(MPG)的应用,探讨EI后处理心肌保护作用的可能机制。为进一步深入研究EI后处理心肌保护机制提供依据 ;为EI的临床应用奠定实验基础。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康雄性SD大鼠,体重250~300 g、8~9周龄、清洁级,由第三军医大学大坪医院实验动物中心提供,证书号:SCXK(渝)2012-0005。
1.2 主要试剂 8%乳化异氟醚(规格:2 mL/支、120 mg/mL,四川大学华西医院刘进教授赠送),脂肪乳(英脱利匹特、30%250 mL),N-(2-巯基丙酰)-甘氨酸(编号:M6635,10g/瓶,Sigma公司),其它为国产分析纯。
1.3 主要仪器 langendorff离体心脏灌注装置、powerlab生物信号采集系统(澳大利亚),透射电子显微镜(日立 H7500日本),CyberScan 310型pH计(美国优特EUTECH新加坡公司),去离子水处理器(美国 Milli QA),BS224S电子天平(德国 sartorius公司)。
1.4 实验方法
1.4.1 建立模型与分组 以95%O2和5%CO2的混合气体预充Krebs-Henseleit(K-H)灌注液(温度37 ~37.5℃、pH 值 7.35 ~7.45)10 min,将K -H 灌注液(单位 mmol/L:NaC1 118.0、KC1 4.7、KH2P041.2、MgSO41.2、NaHCO325.0、CaC121.25、Glucose 10.0)装入平皿中预冷备用;1%戊巴比妥钠(40 mg/kg)和肝素(250 u/kg)腹腔麻醉后固定大鼠,沿两侧腋前线迅速剪开胸腔,从主动脉根部(主动脉近心端保留3~4 mm)取心置于盛有冷(K-H)灌流液的平皿中,除去心脏内血液,迅速将主动脉套入Langendorff灌流装置的灌流针固定,剪去左心耳及剪开肺动脉根部,将充满水的乳胶球囊从左心房经二尖瓣插入左心室,乳胶球囊与压力传感器相连。……
