魏妮娜，王晓明，牛宪立，姬可平

(遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室，广东珠海 519041)

红芪(Radix Hedysari)为豆科植物多序岩黄芪(Hedysarum polybotrys)的干燥根，为甘肃省道地中药材，在甘肃省分布较广，其中岷县最为出名［1］。中药材传统鉴定技术多采用新鲜植株材料，鉴定人员需具备一定的植物分类学知识和经验，市面上销售的红芪多为加工过的药材，其表面性状及显微特征均已发生变化，给鉴定工作带来很大的困难［3］。本文采用ITS序列对中药材红芪从分子水平进行鉴定，旨在探讨ITS条形码技术对中药材鉴定的有效性。

1 材料

1.1 供试材料 供试材料红芪由通讯作者购买于甘肃省定西地区岷县药材公司，并经甘肃中医学院中药鉴定教研室鉴定，凭证标本存放于遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室。

1.2 试验试剂 三羟甲基氨基甲烷(Tris)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、乙二胺四乙酸(EDTA)、醋酸钠、硼酸，购于天津大茂化学试剂厂;Tris－饱和酚、氯仿、异戊醇、浓HCl、异丙醇、无水乙醇，购于广州番禺力强化工厂;琼脂糖、GoldView TM购于庄萌生物;高保真即用型PCR试剂盒、RNase，购于上海生物工程技术服务有限公司;ITS序列扩增引物合成于北京六合华大基因科技股份有限公司。

1.3 试验仪器 液氮罐(东亚液氮罐YDS系列)、高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司)、恒温水浴箱(北京长源实验设备厂)、高速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司)、DYCP－31DN型琼脂糖水平电泳仪(北京六一仪器厂)、EDC－810型基因扩增仪(东胜创新生物科技有限公司)、WD－9413B型凝胶成像分析系统(北京六一仪器厂)。……