曹日亮，车向荣，王红妍，任 杰，孟冬霞

（1.山西省农业科学院畜牧兽医研究所，山西太原030032；2.山西农业大学动物科技学院，山西太谷030801）

小肠肠道黏膜上皮结构的完整性是其消化吸收功能的基本保证，小肠绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度以及绒毛面积是衡量小肠消化吸收功能的重要指标[1-2]。中药添加剂能增加黏膜厚度、绒毛高度与隐窝深度的比值，并且使肠黏膜表面的纹状缘结构整齐均匀，固有层结构清晰，改善肠道的形态结构[3]。同时，中药添加剂还可以提高营养物质的消化率和利用率，促进机体的新陈代谢。

本试验拟进一步考察中药添加剂对断奶仔猪小肠黏膜形态和养分消化率的影响，旨在为中药添加剂预防断奶仔猪腹泻，促进其正常生长提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 试验动物

试验选取28日龄体质量相近的杜长大断奶仔猪72头，根据胎次一致、品种相同、体质量相近、公母各半的原则随机分成4个组，每组3个重复，每个重复6头，试验期为4周。

1.2 中药添加剂制备

中药配方Ⅰ：黄芪，白术，砂仁，陈皮，茴香，藿香，按一定比例配比；中药配方Ⅱ：党参，白术，神曲，紫苏子，陈皮，按一定比例配比。

将各种中药自然干燥，分别精细粉碎并过0.05 mm筛，按配方称质量，混合均匀，制成超微粉剂。

1.3 试验设计及饲粮组成

试验设对照组、中药Ⅰ组、中药Ⅱ组、抗生素组4个处理，对照组饲喂基础日粮，中药Ⅰ组饲喂基础日粮+日粮1%的中药配方Ⅰ，中药Ⅱ组饲喂基础日粮+日粮1%的中药配方Ⅱ，抗生素组饲喂基础日粮+抗生素（表1）。

表1 试验设计及饲粮组成

1.4 消化试验

饲养第4周进行消化试验，采用内源指示剂法，试验期为4 d，每日收粪3次，每次约100 g，装入密封袋中密封，-20℃冰箱中保存。

粪样制备：粪样经流水快速解冻，以重复为单位将所收粪样混匀，加入1/4鲜粪质量的10%酒石酸，于65℃除去初水分，粉碎（过0.42 mm筛），装瓶，待测各养分含量。根据《动物营养学实验教程》分析饲料及粪样中的各种营养成分，计算各养分消化率。

1.5 组织学检查

1.5.1 4%多聚甲醛固定（用于黏膜形态结构）（1）固定。组织块于4%多聚甲醛固定液中固定24 h后，取出经流水冲洗 24 h。（ 2）脱水、透明。组织块经梯度酒精脱水（50%→70%→85%→95%→无水乙醇）各2 h，再依次放入二甲苯与无水酒精（体积比为1∶1）的溶液和二甲苯Ⅰ，Ⅱ中透明各1.5 h。（3）浸蜡与包埋。在浸蜡盒Ⅰ，Ⅱ各浸蜡2 h，随后用60℃石蜡进行包埋（包埋要迅速）。（4）切片。用旋转切片机连续完整切片5张，厚度为5μm。（5）展片和粘片。在45℃水浴中进行展片，载玻片进行粘片（载玻片用粘片剂APES进行处理），37℃条件下烘干24h以上，常温保存，待染色。

1.5.2 HE染色（小肠黏膜形态学结构） 石蜡切片经二甲苯常规脱蜡，二甲苯Ⅰ，Ⅱ脱蜡2次各15 min，二甲苯∶无水酒精（ 体积比为 1∶1）、无水酒精以及各级梯度酒精（95%，85%，70%，50%）、水洗脱各2 min，用苏木精溶液染色约25 min，蒸馏水洗2 min，在0.5%盐酸酒精溶液中分色（70～80 s），以镜检为准，经自来水流水冲洗蓝化15 min，再用蒸馏水洗后，依次用梯度酒精（50%，70%，85%，95%）洗脱（ 各 3 min），放入0.5%伊红酒精液染色10 min，再依次放入95%酒精Ⅰ，95%酒精II（各3 min）和无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ脱水（各5 min），经二甲苯Ⅰ及二甲苯Ⅱ透明（各8 min），中性树胶封片。

1.5.3 观察与测量 光镜下详细观察和比较各肠段黏膜形态结构的变化情况，并用Image-Pro Plus 6.0专业图像分析软件对各肠段的肠壁厚度、绒毛高度、黏膜厚度和隐窝深度进行具体测量。具体检测方法为：每个肠管取5个视野，每个视野选取5根最高绒毛高度、最深隐窝深度、最厚黏膜厚度以及最厚肠壁厚度。

1.6 数据处理

试验数据采用SPSS 17.0统计软件中的ANOVA程序进行方差分析和邓肯氏（Duncan）多重比较，结果以平均值±标准误表示。

2 结果与分析

2.1 中药添加剂对断奶仔猪小肠黏膜形态影响

从表2可以看出，各试验组之间的肠壁厚度和黏膜厚度均无显著差异（P＞0.05），但中药Ⅱ组十二指肠的肠壁厚度以及各肠段（回肠除外）的黏膜厚度都稍微高于中药Ⅰ组和抗生素组（P＞0.05）。中药Ⅰ组和抗生素组的十二指肠和回肠各段绒毛高度与对照组相比，均无显著差异（P＞0.05）；中药Ⅰ组在空肠段的绒毛高度显著高于对照组（P＜0.05），但与中药Ⅱ组和抗生素组相比无显著差异（P＞0.05）；中药Ⅱ组十二指肠的绒毛高度显著高于对照组和中药Ⅰ组（P＜0.05），在空肠和回肠段极显著高于对照组（P＜0.01），并在回肠段显著高于中药Ⅰ组和抗生素组（P＜0.05）。对于各肠段的隐窝深度，各试验组之间均无显著差异（P＞0.05）。

仔猪断奶后会出现绒毛萎缩、隐窝增深的症状，VH/CD可反映出黏膜形态是否正常。从表2可以看出，中药Ⅰ组和抗生素组在十二指肠、空肠、回肠各段的VH/CD与对照组相比，均无显著差异（P＞0.05），但除中药Ⅰ组十二指肠外，均有一定的提高；中药Ⅱ组各肠段VH/CD与对照组相比均有极显著差异（P＜0.01），并且在十二指肠极显著高于中药Ⅰ组（P＜0.01），在回肠极显著高于中药Ⅰ组和抗生素组（P＜0.01）。而十二指肠中，抗生素组的VH/CD显著高于中药Ⅰ组（ P＜0.05）。

表2 中药添加剂对断奶仔猪小肠各段形态学的影响

2.2 中药添加剂对断奶仔猪主要养分表观消化率的影响

饲粮中添加复方中药和抗生素后的主要养分表观消化率的影响如表3所示，对于有机物质的消化率，各组之间无显著差异（P＜0.05）。对于粗蛋白的消化率，中药Ⅱ组极显著地高于对照组（P＜0.01），抗生素组与对照组相比差异显著（P＜0.05）。对于粗脂肪的消化率，中药Ⅱ组极显著高于中药Ⅰ组（P＜0.01），显著高于对照组（P＜0.05），但与抗生素组相比无显著差异（P＞0.05）；对照组、中药Ⅰ组和抗生素组这3组之间无显著差异（P＞0.05）。对于粗纤维的消化率，中药Ⅰ组和中药Ⅱ组均极显著高于对照组（P＜0.01），抗生素组显著高于对照组（P＜0.05）；中药Ⅱ组显著高于抗生素组（P＜0.05），中药Ⅱ组与中药Ⅰ组相比无显著差异（P＞0.05），中药Ⅰ组与抗生素组相比无显著差异（P＞0.05）。钙的消化率，中药Ⅱ组和抗生素组极显著高于对照组和中药Ⅰ组（ P＜0.01），但 2组之间无显著差异（ P＞0.05）；中药Ⅰ组与对照组相比具有显著差异（P＜0.05）。对于磷的消化率，3个处理组均极显著高于对照组（P＜0.01），中药Ⅱ组和中药Ⅰ组显著高于抗生素组（P＜0.05）。

表3 中药添加剂对断奶仔猪主要养分表观消化率的影晌 %

3 讨论

3.1 中药添加剂对断奶仔猪小肠黏膜形态学的影响

小肠绒毛是营养物质吸收的主要部位，绒毛的高度与其肠黏膜上皮细胞数量呈显著相关，绒毛长，则成熟的上皮细胞增加，其对养分的吸收能力升高[4]。隐窝深度则反映了细胞生成率，隐窝变深则肠上皮细胞成熟率下降以及吸收功能增强[5]。绒毛高度与隐窝深度的比值则综合反映了小肠的功能状态，其比值升高反映了黏膜的改善以及消化吸收功能的增强。Van Beers-Schreurs等[6]研究表明，仔猪断奶会引起小肠形态结构发生变化，如绒毛萎缩，绒毛长度和隐窝深度的增加，这些变化将会减少肠道的吸收面积。

饲料添加剂对仔猪肠黏膜的影响也有较多报道，黄芪主要活性物质是黄芪多糖，其能通过维持肠道黏膜结构的完整性和肠道黏膜相关细胞数量，达到增强免疫功能的作用[7]。林斌等[8]报道，在仔猪日粮中添加2%党参汤剂可改善仔猪的肠道形态结构，从而预防仔猪早期断奶引起的腹泻。谢正军等[9]研究表明，壳聚糖锌具有调节断奶仔猪肠道菌群平衡、改善肠黏膜形态的作用。李美君等[10]研究表明，饲粮中添加乳铁蛋白可刺激肠道有益菌生长、降低有害菌增殖，从而改善肠道功能，具有提高仔猪生长性能的作用。杨慧等[11]研究表明，精氨酸是多胺合成的起始物，多胺是小肠黏膜生长、发育、成熟、适应及恢复创伤所必需的物质，对小肠绒毛的修复起着重要作用；而乳酸菌发酵的主要代谢产物是短链脂肪酸，其中的丁酸与细胞凋亡、细胞分化的调控有关，是肠道上皮组织细胞再生和修复的主要营养物质，对肠道上皮组织的再生和修复起重要作用。因此，精氨酸和乳酸菌同时添加具有一定的协同作用。

本试验结果表明，饲粮中添加中药和抗生素对肠壁厚度、黏膜厚度以及隐窝深度无显著影响，但显著提高了小肠绒毛的高度以及绒毛高度与隐窝深度的比值。其中，添加中药配方Ⅱ的效果要优于配方Ⅰ及抗生素组，因此，添加中药Ⅱ组更利于小肠黏膜的消化吸收功能，从而提高仔猪的生产性能。

3.2 中药添加剂对断奶仔猪养分吸收的影响

试验结果表明，饲粮中添加中药和抗生素均能提高仔猪对有机物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、钙及磷的表观消化率。很多文献证实，中药能提高营养物质的消化率和利用率，增强机体的新陈代谢，促进血液循环，提高仔猪的生长速度。本研究结果与上述报道一致。

方热军等[12]研究表明，和抗生素相比，中药添加剂能提高干物质消化率和表观氮存留率。张美英[13]研究表明，饲料中添加山楂粗提物，可以提高粗蛋白、钙以及磷的消化率。晏家友等[14]在断奶仔猪日粮中添加微胶囊型缓释复合酸化剂，可以通过降低肠道pH值，优化肠道微生物区系，改善肠组织形态和功能，从而提高断奶仔猪肠道的消化力和适应性，并促进仔猪生长。游玉波等[15]研究表明，将苍术、山楂、神曲以及甘草等中药粉剂按一定比例加入到饲粮中，可以提高生长猪对饲料干物质、粗蛋白、粗灰分以及粗纤维的表观消化率。本试验结果表明，饲粮中添加中药配方II时，饲粮中营养物质的表观消化率要优于中药I组和抗生素组。

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