Snail和N-cadherin在乳腺浸润性导管癌中的表达
2013-09-14熊正文韩亚伟张华东
曹 莉,熊正文,黄 勇,韩亚伟,苏 红,张华东,李 伟
研究发现肿瘤细胞的浸润转移是患者病死率较高的一个重要原因,上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和癌细胞脱离原发部位在浸润转移过程中起重要作用[1]。Snail和N-cadherin异常的表达是EMT发生的一个重要机制,增加了癌细胞的侵袭转移性[2]。现探讨Snail和N-cadherin在乳腺不同病变组织中的表达变化差异、与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系以及它们的相关性,旨在探讨其在乳腺癌发生、发展和浸润转移中的作用。
1 资料与方法
1.1 标本来源 解放军251医院病理科于2008年1月—2009年12月收集乳腺普通型增生、乳腺导管内癌组织标本各30例,乳腺浸润性导管癌80例。乳腺普通型增生年龄28~56岁,中位数42岁。乳腺导管内癌年龄30~62岁,中位数48岁;低级别癌8例,中级别癌15例,高级别癌7例,均无淋巴结转移。乳腺浸润性导管癌年龄22~75岁,中位数50岁;组织学分级Ⅰ~Ⅱ级55例,Ⅲ级25例;TNM分期Ⅰ~Ⅱ期26例,Ⅲ~Ⅳ期54例;有淋巴结转移46例,无淋巴结转移34例。术前均未接受化疗、激素治疗及放疗。
1.2 主要试剂 兔抗人Snail多克隆抗体购自Abcom 公司(17732),N-cadherin(MAB-0571)、免疫组化SP试剂盒及DAB显色剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司。
1.3 免疫组化染色(SP法) 标本均经10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,4 μm连续切片,采用0.01 mmol/L的枸橼酸缓冲液抗原修复,染色程序按SP试剂盒说明书进行。以PBS代替一抗作阴性对照,已知阳性切片为阳性对照。
1.4 结果判定 Snail免疫组化阳性信号以胞核出现棕黄色为阳性细胞,按染色强度的深浅积分,0分:无染色,1分:弱阳性,2分:强阳性;按着色细胞百分比积分,1分:≤25%,2分:26% ~50%,3分:51% ~75%,4分:>75%;按照阳性细胞×染色强弱计积分,积分1~2分为阴性,3~8分为阳性[3-4]。……
