姜安娜 曹名锋 李庆刚 郑平 杨洪江 孙际宾

赖氨酸是世界上仅次于谷氨酸的第二大氨基酸品种，目前主要应用于饲料添加剂［1-3］、食品添加剂和医药中间体［4-8］。随着科技的发展，赖氨酸品种已经发展出赖氨酸盐酸盐、蛋白赖氨酸和液体赖氨酸等［9，10］。截止到2010年底，世界市场每年的赖氨酸需求量达140万吨，按照工业赖氨酸计算，其直接市值达200亿元，间接市场难以估量［11］。

目前常用的赖氨酸检测方法主要有酶法、高效液相色谱（HPLC）和化学法（茚三酮）法。酶法主要是通过赖氨酸在特异的氧化酶催化下发生氧化还原反应，其电子产物在生物传感器电极表面形成电流从而进行测定，检测准确度和应用性受酶活力和酶价格的限制；HPLC方法采用2，4-二硝基氟苯（DNFB）、1-氟-2，4-二硝基苯基 -5-L-丙氨酰胺（FDAA）等衍生化试剂，虽然能够精确区分和测定D-/L-型赖基酸的含量，但对仪器精密度和操作人员要求极高，并且易受样品中杂质成分的干扰，不适合工业发酵液中赖氨酸的检测；化学法主要指茚三酮方法，基本原理为：氨基酸与水合茚三酮共同加热后可发生氧化脱氨反应，生成NH3与酮酸；加热过程中酮酸裂解，放出CO2，自身变为少一个碳的醛，水合茚三酮变为还原型茚三酮。NH3与水合茚三酮及还原茚三酮脱水缩合，生成蓝紫色化合物［12］。传统的茚三酮检测方法无法排除杂质氨基酸的干扰，且反应过程中易受pH和温度变化的影响，造成测定结果准确性降低［13，14］。本研究在传统的茚三酮试剂中添加了铁离子（Fe3+），通过铁离子对脯氨酸、鸟氨酸、甘氨酸、精氨酸、组氨酸与茚三酮反应的抑制作用，从而提高茚三酮溶液与赖氨酸反应的特异性［15］。……