裂谷热假病毒颗粒研制及鉴定
2013-09-13邓俊花林祥梅张永宁冯春燕王彩霞吴绍强
邓俊花 林祥梅 张永宁 冯春燕 王彩霞 吴绍强
裂谷热(Rift valley fever,RVF)是由蚊子作为传染媒介的病毒性传染病,主要感染反刍动物,如绵羊、山羊和牛,可引起怀孕动物流产和幼小动物死亡[1]。在疫病流行期间,也会引起人类发病。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定上报的A类动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。历史上,裂谷热主要在非洲撒哈拉以南地区流行,2000年8月向北蔓延到亚洲的阿拉伯半岛(也门和沙特阿拉伯),对我国构成了严重威胁[2]。
为了有效监控并防止裂谷热疫情的传播,Sall等[3,4]建立了裂谷热的巢式RT-PCR检测方法,并在肯尼亚(1998年)及南非(1999年)的两次疫情诊断中发挥了重大作用。Drosten等[5,6]建立了裂谷热一步法实时定量RT-PCR检测方法。但由于安全有效阳性质控物质的缺乏,导致上述检测技术难以在非疫区推广应用。近几年,Pasloske等[7,8]提出了一种新的RNA质控品制备技术,即装甲RNA(Armored RNA)技术,利用该技术制备的假病毒颗粒稳定、安全,并能有效监控RNA样品核酸制备及RT-PCR反应的全过程。病毒样颗粒(Virus like particle,VLP)是含有某种病毒的一个或多个结构蛋白的空心颗粒,不含病毒核酸,不能自主复制,但可以组装成颗粒样结构,其结构和抗原表位与天然的病毒颗粒十分相似,具有较强的免疫原性及较好的安全性。在体外通过特殊方法将病毒样颗粒与重组质粒DNA(如基因疫苗)融合,转录成的重组RNA包入病毒样颗粒内,即形成假病毒(pseudovirus)。
RVFV属布尼亚病毒科白岭病毒属(phlebovinzs)RNA病毒,具包膜,核酸共分L、M和S 3个节段,L节段编码RNA多聚酶,M节段编码病毒包膜蛋白,均为负链RNA。……
