尚培中，王 金，马学柱，谷化平

胰腺癌是常见的消化系统恶性肿瘤。生存素(survivin)在肿瘤侵袭和转移过程中发挥了重要作用［1-5］。本研究应用免疫组织化学 EliVisionTMplus法对胰腺癌组织进行生存素检测，旨在探讨其表达与胰腺癌浸润和转移的关系，为判断患者预后提供理论依据，为指导临床治疗提供客观参考指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集解放军251医院2000年3月1日—2010年2月28日胰腺癌根治性手术切除标本70例，男44例，女26例;年龄33～79岁，平均62.3岁。均经组织病理学诊断为原发性胰腺导管腺癌，其中高、中、低分化腺癌分别为25例、26例和19例;在70例中，选取距肿瘤至少3 cm以上癌旁非肿瘤胰腺柔软组织标本15例。所有病例术前未行化疗、放疗及免疫治疗。依据国际抗癌联盟(international union for cancer control，UICC)第 6版标准［6］进行 TNM 分期。

1.2 方法 免疫组化染色采用EliVisionTMplus法。兔抗人生存素单克隆抗体为英国Abcam公司产品，EliVisionTMplus免疫组化染色试剂盒、DAB显色液均购自迈新生物技术有限公司。手术标本经10%中性甲醛溶液固定，石蜡包埋，常规制备4 μm厚切片，65℃烘烤备用。采用微波－枸橼酸钠缓冲液修复抗原，生存素工作浓度为1∶15，染色步骤严格按照试剂盒说明书进行，以PBS溶液代替一抗做空白对照，以排除假阳性结果。15例癌旁非肿瘤胰腺组织标本作阴性对照，用随试剂所附已知阳性对照片作阳性对照。

1.3 结果判断标准 由两位有经验的病理医师在光学显微镜下对染色切片进行观察并确认。在400倍光镜下对每张切片任选5个视野进行观察。背景染色清晰，细胞质和(或)细胞膜呈棕黄色或棕褐色为阳性，阳性细胞占细胞总数＜10%为阴性，≥10%为阳性。……