孙晓东 王 原 代素梅 张绍华 王海波 杨照环 刘华群 侯秀珍 于翠萍(唐山市工人医院肿瘤科，河北 唐山 063000)

单核细胞是机体先天性免疫应答和获得性免疫应答的重要成员之一〔1〕。单核细胞的异常发育，必然导致机体免疫系统功能和机体内环境紊乱，引发多种疾病。骨髓造血干细胞分化为单核细胞受多种细胞因子影响，其中表皮生长因子(EGF)是骨髓造血干细胞分化的重要生长因子，可以促进成纤维细胞、间充质细胞和肿瘤细胞产生一些趋化因子，尤其是单核细胞趋化因子(MCP-1)蛋白。作为单核巨噬细胞特异性的趋化因子，MCP-1在诱导单核细胞成熟、趋化以及参与炎症和肿瘤组织浸润等生物学效应中发挥着重要的作用〔2〕。厄洛替尼作为EGF受体的特异性抑制剂已经在临床中广为使用，多数癌症患者从中受益。然而，厄洛替尼是否能够通过抑制EGF对单核细胞的作用，从而改变单核巨噬细胞的功能活性是本研究拟解决的问题。

1 材料与方法

1.1 单核细胞培养 把单核细胞系RAW264.7(购自美国ATCC)用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤2次，悬浮于含10%小牛血清的 RPMI1640培养基中，37℃ 5%CO2条件下培养2 h，收集未贴壁细胞置于新的培养瓶中，调整细胞密度至1×106/ml，用于单核细胞的传代培养。将离体培养的单核细胞分为四组:空白对照组、EGF处理组、厄洛替尼处理组、EGF联合厄洛替尼处理组。EGF、厄洛替尼作用浓度分别为 10 ng/ml、4 μmol/L。联合组为EGF先作用24 h后再加厄洛替尼作用4 h。

1.2 方法

1.2.1 噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖变化 调节RAW264.7细胞浓度，以3×103/孔接种于96孔培养板中，每组设6个复孔，转染方法和转染后处理同前。……