人脐血和外周血单个核细胞中神经营养因子表达水平研究
2013-09-12范存刚王栋梁张庆俊周景儒
山东医药 2013年33期
范存刚,王栋梁,张庆俊,周景儒
(北京大学人民医院,北京 100044)
随着干细胞研究的深入,干细胞移植有望成为 治疗神经系统疾病的新方法。虽然已有胚胎干细胞、神经干细胞、骨髓间充质干细胞修复神经损伤的报道[1,2],但由于目前存在神经干细胞数量有限、取材困难,胚胎干细胞分离纯化技术困难、伦理与法律争议和形成畸胎瘤的风险,骨髓间充质干细胞随供者年龄增长出现含量和增殖能力下降的诸多问题[2,3],因此,寻找可靠而易于获得的细胞来源,成为细胞移植治疗神经系统疾病的首要问题。人脐血细胞具有来源丰富、采集方便、无伦理和法律障碍等优点,能在适宜的条件下分化为神经细胞并修复神经损伤[4],故有望成为治疗神经系统疾病的理想细胞来源。然而,体内移植后,仅有不足10%的人脐血单个核细胞(UCB-MNCs)表达神经表型[4],难以解决动物模型或患者神经功能的迅速恢复问题。2009~2011年,我们检测了UCB-MNCs、成人外周血单个核细胞(APB-MNCs)内5 种神经营养因子的表达水平,旨在为阐明UCB-MNCs 修复神经损伤的机制奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料 人脐血取自我院产科15例足月妊娠、正常分娩产妇的婴儿脐血,成人外周血取自我院健康查体的12例年龄22~38岁的成人外周血,均在无菌条件下采集。将脐血及外周血贮存于4 ℃冰箱内,在6 h 内进行细胞分离。1%牛血清白蛋白购自Sigma 公司;LG-DMEM、胎牛血清和青霉素、链霉素均为Gibico 公司产品;脑源性神经营养因子(BDNF)和神经营养因子-4/5(NT-4/5)的ELISA 试剂盒分别购自Chemicon 公司和Promega 公司;5 种神经营养因子的引物均由上海生工生物合成。……
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