祁赞梅，赵国明，韩 雪，杨 冀，冯 辉，曹雅明

(中国医科大学基础医学院免疫学教研室，辽宁沈阳 110001)

Tim-1是T细胞免疫球蛋白域和黏液素样域(T cell immunoglobulin domain and mucin domain，Tim)基因家族的分子，表达在T细胞、B细胞、树突状细胞等多种免疫细胞表面，为细胞活化提供协同刺激信号，刺激Th2细胞增殖和分泌细胞因子［1-4］。研究发现，小鼠体内分泌IL-10的调节性B细胞(regulatory B cells，Bregs)表面表达Tim-1，Tim-1结构异常导致Bregs数量和功能缺陷［5-6］。由于Bregs具有抑制Th1应答的作用［7］，可以推Tim-1在免疫应答的调节中，特别是Th1/Th2应答的极化发挥重要的作用。疟疾是疟原虫通过媒介昆虫蚊传播的人类最为严重的寄生原虫感染性疾病。抗疟保护性免疫有赖于Th1和Th2型免疫应答的有效建立和协调过渡［8-9］。在约氏疟原虫P.y17XL感染模型中发现，BALB/c小鼠原虫血症难以控制并最终导致死亡与Th1应答难以建立和血浆高水平IL-10有关［10］。由于Tim-1具有调节Th应答和维持Bregs功能的作用，本研究观察了P.y17XL易感和抵抗小鼠中，Tim-1分子表达与Th应答及感染结局的关系，旨在为疟疾免疫应答调控提供新靶点。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物及疟原虫 DBA2和 BALB/c小鼠，6～8周龄，购自北京华阜康生物科技股份有限公司;约氏疟原虫P.yoelii 17XL(P.y17XL)由日本爱媛大学分子寄生虫学教研室赠予曹雅明教授。

1.1.2 主要试剂 抗-CD4-APC(GK 1.5)、抗-CD19-PE/Cy5(6D5)、抗-Tim-1-PE(RMT1-4)、TruStain fcX抗-CD16/CD32(93)及同种型对照均购自美国BioLegend公司，逆转录试剂盒Prime-Script RT Reagent Kit和实时定量 PCR试剂盒SYBR Premix Ex Taq II购自大连宝生物公司。

1.2 方法

1.2.1 实验动物感染 取1× 106P.y17XL寄生的红细胞(pRBC)经腹腔感染小鼠，自感染后3 d经尾静脉采血，制备薄血膜，Giemsa染色，显微镜检计数红细胞感染率。……