薛永常，张 灿

(大连工业大学生物工程学院，辽宁大连 116034)

几丁质是由N-乙酰-D-氨基葡萄糖以β-1，4糖苷键连接成的高分子多糖，广泛存在于甲壳动物和昆虫的外壳及藻类、真菌类的细胞壁及高等植物中［1］。几丁质降解获得的生理活性的几丁寡糖水溶性好，易于吸收，具有较好的抗真菌、抗癌良好的生物降解性及无毒性等特点，已广泛应用于医药、食品、农业、环保和保健等领域［2-7］。目前制备几丁寡糖的方法有物理降解法、化学降解法、酶解法和合成法［8］。酶解法反应条件较温和，具有不需要加入其他反应试剂，不发生其他副反应，产物聚合度适中、高效、节能、无污染等优点，是公认的最佳生产工艺。目前制备的几丁质酶活性较低，难以获得大量的专一性的几丁质酶，使几丁质酶的生产成本过高，不能满足生产的需要，因此研究高活性几丁质酶是解决几丁寡糖生产制备的关键［9］。几丁质酶(chitinase)是能催化降解几丁质β-1，4糖苷键的一类水解酶，许多微生物都能产生几丁质酶［9-12］。在海洋环境中有着大量几丁质，其降解主要通过微生物完成，海洋菌是几丁质酶的重要来源。本文从大连海域的泥样中筛选出1株能将几丁质转化成多种低聚糖的海洋菌，通过对该菌株进行生物学鉴定为将来更好地认识和进一步利用它提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 几丁质购于合肥博美生物技术有限公司;乙酰氨基葡萄糖(NAG)购于阿尔法公司;胶体几丁质自制［13-14］;薄层层析用硅胶G购于青岛海洋化工有限公司;细菌基因组DNA提取试剂盒(溶液型)购自北京百泰克生物技术有限公司;琼脂糖回收试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司。……