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厌氧菌群SVY42产酶条件分析及产木聚糖酶菌株的分离鉴定

2013-09-12邓云金刘晓艳黄一帆

微生物学杂志 2013年3期

赵 超,李 婷,邓云金,刘晓艳,黄一帆,3,刘 斌*

(1.福建农林大学食品科学学院,福建福州 350002;2.国家菌草工程技术研究中心,福建福州 350002;3.福建农林大学动物科学学院,福建福州 350002)

半纤维素是自然界中含量丰富的可再生资源,其含量仅次于纤维素含量。目前,国内外报道主要集中在半纤维素降解单菌上,但单菌株很难将半纤维素复杂成分一步降解,并且在保持分解能力上存在一定问题。在半纤维素降解研究上,逐渐重视混合菌群的作用。半纤维素的主要组成部分是木聚糖,约占植物细胞干重的35%。木聚糖酶(EC3.2.1.8)是一种重要的工业用酶,广泛应用于食品、酿造、饲料和造纸等行业[1]。但是,木聚糖酶的低生产率和高成本依然是影响其规模化工业应用的重要原因。因此,木聚糖酶高产菌的选育仍具有重要的经济和社会意义。从极端环境中筛选有工业应用价值的木聚糖酶产生菌,是得到高效木聚糖酶的有效手段[2]。温泉生态系统由于其生境的特殊性,蕴藏着特殊的微生物资源与酶资源。本研究对采集自美国内华达州大盆地温泉样品进行富集,获得了菌群结构稳定的半纤维素降解菌群,并从菌群中筛选到高产木聚糖酶厌氧菌株,通过16S rDNA序列、生理生化等方面对该菌进行了初步分析鉴定。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 实验样品为采集自美国内华达州大盆地温泉(41D 31'57.2"N,120 D 04'15.7"W;41D 32'03.4"N,120 D 04'23.9"W)的水样和泥样。

1.1.2 菌株和试剂 E.coli DH5α、载体 pMD18-T、Ex Taq DNA polymerase、dNTP mixture、dTTP、dCTP、T4 DNA Ligase(TaKaRa);琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒、Plasmid Mini Kit、PCR产物纯化试剂盒(TIANGEN);刃天青、L-cystein、木聚糖(Sigma)。

1.1.3培养基……

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